湖南生物机电职业技术学院学生课堂内实验报告
姓名__陈艳龙__学号学号___11_____专业班级专业班级___生技09311_____姓名
课程名称
仪器分析
实验名称
紫外分光光度法测定饮料中的防腐剂
实验目的及要求：实验目的及要求：
1．掌握蒸馏操作；2．掌握紫外可见分光光度法测定苯甲酸的方法和原理。
实验原理：实验原理：
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验采用蒸馏法对鲜橙多中的苯甲酸进行了测定，苯甲酸（钠）在225
m处有最大吸收，可在225
m波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
主要仪器、设备、器材及药品：主要仪器、设备、器材及药品：
紫外分光光度计，蒸馏装置；无水硫酸钠，磷酸，硫酸，氢氧化钠，重铬酸钾，苯甲酸；鲜橙多
实验步骤及原始数据：实验步骤及原始数据：
1、样品前处理：准确称取100g均匀的样品，置于250mL蒸馏瓶中，加1mLH3PO4，20g无水Na2SO4，70mL水，三粒玻璃珠进行第一次蒸馏。用预先加有5mL01molL1NaOH的50mL容量瓶接收馏出液，当蒸馏液收集到45mL时，停止蒸馏，用少量水洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。吸取上述蒸馏液25mL，置于另一个250mL蒸馏瓶中，加入25mL0033molL1K2Cr2O7溶液65mL2molL1H2SO4溶液，连接冷凝装置，水浴上加热10mi
，冷却，取下蒸馏瓶，加入1mLH3PO4、20g无水Na2SO4、40mL水和三颗玻璃珠，进行第二次蒸馏，用预先加有的5mL01molL1NaOH的50mL容量瓶接收蒸馏液，当蒸馏瓶收集到45mL左右时，停止蒸馏，用少量洗涤冷凝器，最后用水稀释至刻度。根据样品中苯甲酸含量，取第二次蒸馏液5～20mL，置于50mL容量瓶中，用001molL1NaOH定容，以001molL1NaOH作为对照液，于紫外分光光度计225
m处测定吸光度。2、标准曲线的制作取苯甲酸标准溶液200、400、600、800、1000mL，分别置于50mL容量瓶中，001molL1NaOH用溶液稀释至刻度。以001molL1NaOH溶液为对照液，测定其中5号标准溶液的紫外可见吸收光谱（测定波长范围为200350
m），找出λmax，然后在λmax处测定五个标准溶液的吸光度Ai，绘制标准曲线。
f将标准溶液的质量浓度c和吸光度A数据填入表1中
表1测定次数
cmgmLA
－1
苯甲酸标准溶液浓度及吸光度测定数据12345
2、绘制标准曲线以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。3、计算样品中苯甲酸含量将实验测r