紫外可见分光光度法测食品中苯甲酸含量
实验目的
１、掌握紫外分光光度计的使用方法及正确操作方法；２、了解不同食品中防腐剂测定的预处理方法及测定方法；
实验原理
为了防止食品在储存、运输过程中发生腐败、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。其使用量一般在01左右。苯甲酸具有芳香结构，在波长225
m和272
m处有K吸收带和B吸收带。
由于食品中苯甲酸用量很少，同时食品中其它成分也可能产生干扰，因此一般需要预先将苯甲酸与其它成分分离。从食品中分离防腐剂常用的方法有蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验测定雪碧中苯甲酸，样品不用处理，苯甲酸（钠）在225
m处有最大吸收，可在225
m波长处测定标准溶液及样品溶液的吸光度，绘制标准曲线法，可求出样品中苯甲酸的含量。
实验步骤
一、样品处理
液体样品
取酱油10ml于１２５ml分流漏斗中，加入12v盐酸溶液２ml进行酸化，用无水乙醚
萃取二次，每次３０ml，每次振摇１mi
。
合并乙醚层于另一干净分流漏斗中，用５％NaCL溶液洗涤二次，每次５～１０ml。然
后蒸馏瓶回收乙醚，用20ml5NaHCO3溶液溶解，定容至１00ml备用。固体或半固体样品：如果冻等，将样品捣碎，称取10g左右，用10NaOH溶液调节到
碱性，定容至100ml放置30mi
，过滤，取10ml滤液于125ml分液漏斗中，加入12v盐酸溶液酸化，然后用乙醚进行萃取，其余过程与液体样品处理相同。
二、标准曲线的绘制：取苯甲酸标准使用液0、1、2、4、6ml分别置于100ml容量瓶中，各加入5NaHCO3溶液2ml，12v盐酸溶液２ml，加水至刻度，摇匀。放置15mi
尽量让CO２逸尽。用1cm吸收池于波长230
m处测定其吸光度。以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐标绘制标准曲线。取样品处理液10ml于容量瓶中加入12v盐酸溶液2ml摇荡以排除CO２，加水至刻度、摇匀、放置15mi
，与标准系列一起进行比色测定，根据测得吸光度，在标准曲线上查出其对应量，就可以计算出样品中苯甲酸（钠）的含量。
三、计算与结果
1．记录数据
将标准溶液的质量浓度ρ和扣除A0的吸光度A数据填入表1中
表1苯甲酸标准溶液浓度及吸光度测定数据
测定
0ml
1ml
2ml
4ml
6ml酱油
果冻
ρmgmL－1
A
f思考题
1举例说明日常生活中遇到的哪些食品中有防腐剂？2用什么方法从样品中把苯甲酸分离出来？3如何确定样品中防腐剂为苯甲酸？4苯甲酸通过什么排泄？5如何利用一元线性回归r