紫外可见分光光度计法测定食品中防腐剂的含量
一、实验目的1进一步了解和熟悉紫外分光光度计的原理和结构，以岛津UV2450为例学习紫外分光光度计的操作。2掌握利用紫外分光光度法测定苯甲酸和山梨酸的吸收光谱图。3掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸和山梨酸及其钠盐和钾盐的含量。
二、实验原理为了防止食品在储存、运输过程中发生腐蚀、变质，常在食品中添加少量防腐剂。防腐剂使用的品种和用量在食品卫生标准中都有严格的规定，苯甲酸和山梨酸及其钠盐、钾盐是食品卫生标准允许使用的主要防腐剂之一。苯甲酸具有芳香结构，在波长225
m和272
m处有K吸收带和B吸收带。根据苯甲酸（钠）在225
m处有最大吸收，测得其吸光度即可用标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。山梨酸具有αβ不饱和羰基结构，在波长255
m处有ππ跃迁的K吸收带，因此可根据它们的紫外吸收光谱特征可以对它们进行定性鉴定和定量测定。由于食品中防腐剂用量很少，GB27602011规定0215gkg，并且食品样品中其它的成分也可能对防腐剂的测定具有干扰作用，因此一般可预先将样品中的防腐剂与其它成分进行分离，再经过提纯和浓缩进行测定。常用的分离方法包括蒸馏法和溶剂萃取法等。本实验采用溶剂萃取法，先用HCl溶液将样品进行酸化，再利用乙醚将这两种防腐剂品从样品中萃取出来，然后将乙醚蒸发，剩下的萃取物经过碱性溶液（NaOH）溶解与处理。最后对照标准物质，利用紫外分光光度计对目的成分进行检测。
三、实验仪器和试剂1紫外可见分光光度计UV2450（日本岛津），10cm石英比色皿，50mL容量瓶。2HCl溶液（11）、NaOH溶液（40gL）、NaCl溶液（5）。3苯甲酸钠标准溶液的配制（1）苯甲酸钠标准贮备液（1000gL）：准确称量经过干燥的苯甲酸钠1000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。该贮备液可置于冰箱保存一段时间。（2）苯甲酸钠标准溶液（32mgL）：准确移取苯甲酸钠储备液3200mL于1000mL容量瓶中，加入蒸馏水稀释定容。（3）系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液050mL、100mL、150mL、200mL和250mL于5个10mL容量瓶中，用NaOH溶液稀释定容。得到浓度分别为
f16mgL、32mgL、48mgL、64mgL和80mgL的苯甲酸钠系列标准溶液。4山梨酸钾标准溶液的配制（1）山梨酸钾标准贮备液（1000gL）：准确称量经过干燥的山梨酸钠1000g（105℃干燥处理2h）于1000mL容量瓶中，用适量的蒸馏水溶解后定容。该贮备液可置于冰箱保存一段时r