本试验中所使用的中和剂必须既能有效抑制消毒剂的杀菌性(中和剂的效力试验)同时又不削弱微生物活力的恢复(中和剂的毒性试验)。②中和剂效力、毒性确认用稀释剂将试验菌制成5×105~5×106cfuml的的菌悬液备用。准备无菌试管6支,按表一试验操作步骤表分组进行操作。各组试昝充分震荡放置于振荡器震荡至少20秒或在手掌上振敲80次,然后移取Iml混合液到平皿中做平皿计数,轻轻转动平皿以使菌落在培养基表面均匀分散开来,每组做两皿平皿,并做好标记。平皿在层流台下吹干,倒置于37℃下培养48小时后计数。具体结果见附件一中和剂中
4
f和效力评估测试记录
5
f表一中和剂效力、毒性确认试验操作步骤及结果判断
分组
试验操作
试验目的
试验结果判断
A45ml消毒剂05ml菌悬液作用10mi
取05ml作用液45ml稀释观察消毒剂对试验菌有无杀应无试验菌生长或极少数菌落生长
液试管中混匀,吸取1ml最终作用液于平皿中,做活菌计数。
灭或抑制能力。
B45ml消毒剂05ml菌悬液作用10mi
取05ml作用液
B组菌落数比C、D、E组少,并符合下列45ml中和观察残留消毒液被中和后受要求:
A组平均菌落数B组平均菌落数
剂试管中混匀,吸取1ml最终作用液于平皿中,做活菌计数。
到消毒剂作用后的试验菌是
0
>5
否能恢复生长。
X1~10Y>10
>X5>Y05Y
C45ml中和剂05ml菌悬液作用10mi
取05ml作用液45ml中观察中和剂是否抑菌。
和剂试管中混匀,吸取1ml最终作用液于平皿中,做活菌计数。
D45ml中和产物液05ml菌悬液作用10mi
取05ml作用液45ml观察中和产物,或未被完全
中和剂试管中混匀,吸取1ml最终作用液于平皿中,做活菌计数。中和的残留消毒剂对试验菌
的生长繁殖是否有影响。
E45ml稀释液05ml菌悬液作用10mi
取05ml作用液45ml稀作为菌数对照
释液试管中混匀,吸取1ml最终作用液于平皿中,做活菌计数。
F分别吸取1ml中和剂和1ml灭菌09氯化钠溶液于平皿中做活菌计数。作阴性对照
应无菌落生长
备注若菌落太多不能计数,则移取1ml上述混合物,到9ml灭菌注射的生理盐水中(稀释10倍),充分振荡后再移取1ml做平皿计数。
试验结果符合上述所有条件,所测中和剂才可判为合格。
f33消毒剂杀菌效率确认(定量悬浮试验)。331原理将定量的细菌悬液加入消毒剂溶液中,作用一定时间。去除残留的消
毒剂影响后,以上液定量接种于营养琼脂平板上。经培养后计算其菌落数。与未经消毒
剂作用的对照菌液平板计数相比较,计算出杀菌效率。
332菌悬r