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,从而达到纯化有效成分的目的。(6)结晶沉淀法(7)等电点沉淀法:等电点易形成沉淀析出,常与盐析法、有机溶剂沉淀法等配合使用。
第五章层析技术
一相关概念:
1层析:以基质为固定相(呈柱状或薄层状),以液体或气体为流动相,使有效成分和和杂质在这两个相中连续不断,反复多次地进行分配或交换,吸附作用,最终达到分离混合物的目的。2固定相:位置相对不动,对样品产生保留的一项。它可以是固体物质,也可以是固定于载体上的液体物质;能与待分离的化合物发生可逆的吸附,脱吸附的过程。
f3流动相:在层析过程中,推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体,气体等。柱层析中称为洗脱剂,薄层层析中称为展层剂。4分配系数:是指一组分在固定相与流动相中含量的比值,常用k表示。5正相色谱:固定相的极性高于流动相的极性,非极性分子或极性大分子先从柱中流出来,分离纯化极性大的分子。6反相色谱:固定相的极性低于流动相的极性,极性分子或极性小的分子先从柱中流出来,分离纯化极性小的分子。7操作容量:在特定条件下,某种成分与基质反应达到平衡时,存在于基质上的饱和容量。
二知识点:
1层析方法分类:(1)根据流动相形式不同:液相层析,气相层析(2)根据固定相形式不同:柱层析,纸层析薄层层析(3)根据原理不同:吸附层析,分配层析,离子交换层析,凝胶过滤层析,亲和层析。
第六章离子交换层析
一相关概念:
1离子交换层析:以离子交换剂为固定相,液体为流动相的系统中进行的层析方法
二知识点:
1分离原理:离子交换剂与溶液中离子或离子化合物的反应主要以离子交换方式进行,或者借助离子交换剂上电荷基团对溶液中离子或离子化合物的吸附作用进行。2[1]离子交换剂的组成:基质(载体),电荷基团(或功能基团),反离子。[2]离子交换剂的种类:1阳离子交换剂:活化处理方式CM纤维素。2阴离子交换剂:活化处理方式DEAE纤维素。3层析操作步骤层析柱的选择平衡缓冲液的选择装柱加样洗脱收集样品的脱盐和浓缩4洗脱方式单一洗脱法(适用于组分简单),阶段洗脱法,连续洗脱法(最常用)
第七章吸附层析法
一相关概念:
1吸附层析法:以多孔凝胶填料为固定相,利用分子筛功能将分子大小不同的样品组分加以分离的方法。
f二知识点:
1分离原理:在吸附剂表面存在着许多随机分布的吸附位点,这些位点通过范德华力和静电引力与蛋白质核酸等生物分子结合,混合物在层析柱不断吸附,解吸r
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