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生物化学技术原理及应用
题型:
1填空题:(05分/空,共20分)2名词解释:(2分/个,共10分)3判断题:(1分/题,共20分)4简答题:(10分/题,共50分)
第一章生物大分子物质的制备
一相关概念:
1抽提:用抽提液(常用缓冲液,稀酸,稀碱,有机溶剂例如丙酮,乙醇)进行反复萃取,将原料中有效成分最大限度分离出来的过程。
二知识点:
1理想抽提液具备:有效成分溶解度大,杂质不溶解或溶解度很小,来源广泛,价格低廉,操作安全。2影响有效成分抽提的因素:溶液PH(偏离等电点的稳定范围内)离子强度(极性大在离子强度高,极性小在离子强度低),温度(低温0摄氏度时最稳定),搅拌(促使抽提物抽提液相互接触,增加溶解度,采用温和适中的速度,速度慢起不到搅拌作用,速度快产生气泡,使酶变性失活)氧化(氧化剂氧化分子与巯基导致失活,加入还原剂防止氧化),水解酶(蛋白受本身固有水解酶影响,加入抑制剂后使水解酶丧失活性),金属离子(蛋白与金属离子结合生成沉淀复合物,用无离子水或重蒸水配制试剂,配制试剂中加1~3mmol/LEDTA),抽提液与抽提物比例51抽提液过多有利于有效成分提取,不利于纯化程序。否则,反之。3浓缩常用方法沉淀法,吸附法,超过滤法,透析法,离心法,干燥法。4影响生物大分子保存的主要因素空气(隔绝),温度(低温方面),水分,光线,样品的PH,时间。
第二章离心
一知识点:
1离心的基本原理:生物样品悬浮液在高速旋转下,在巨大的离心力作用下,离心力大于悬浮力,使悬浮颗粒以一定的速度沉降下来。
f2离心力表示方法:rpf3离心机的种类:普通离心机(转速小于1000),高速离心机,超速离心机(转速大于2000)。4离心机主要构件:转子,离心管5离心基本方法:沉淀离心,差速离心,密度梯度离心6离心机操作时注意1转速设定,离心力悬浮力/2。2对称于中心的两个离心管重量要平衡。3加样量勿超过34。4对于低温离心机要预先设置低温。5离心过程中注意听声音,看仪表。
第三章电泳技术
一相关概念:
1电泳:带电颗粒在电场作用下,向着与其电荷相反的电极移动的现象。2电泳迁移率:带电粒子在单位时间内移动的距离叫电泳迁移率。3电渗现象:液体层相对于介质移动的现象。4两性电解质:所带电荷随着溶液酸碱度的变化而变化,酸性溶液中带正电荷,碱性溶液带负电荷。5印迹:将生物大分子凝胶转移到物像载体上。
二知识点:
1影响电泳分离的主要因素内因:分子r
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