加入10mL乙腈、15mL20盐酸羟胺、5mL浓度为0125molL乙酸铵缓冲液、10mL乙腈，振荡1mi
，超声5mi
，4500rmi
离心5mi
，上清液倒入250mL分液漏斗中。往分液漏斗中加入3mL02molL硼氢化钾、2mL二甘醇、20mL二氯甲烷，盖塞，剧烈振摇1mi
，静置分层，下层液体转移至鸡心瓶中，45℃旋转减压蒸至近干。
134净化将PRS柱安装在固相萃取装置上，上端连接酸性氧化铝小柱，下端连接PRS小柱，5mL乙腈活化。鸡心瓶中加入25mL乙腈溶解残渣，将乙腈转移至萃取小柱上，依次过柱，再用乙腈清洗鸡心瓶2次，每次25mL，依次过柱，弃去氧化铝小柱，在不抽真空的情况下，吹PRS柱至近干，然后加入3mL等体积混合的乙腈和01molL乙酸铵缓冲液洗脱，收集洗脱液，乙腈定容至30mL，过045μm滤膜，供液相色谱测定。
135色谱条件色谱柱ThermoAcclaimC18、安捷伦ZORBAXSBC18，46mm×250mm，5μm柱温35℃，流动相为乙腈∶0125molL乙酸铵缓冲液（964g乙酸铵溶于1L水，乙酸调pH为45）80∶20，流速1mLmi
，进样量20μL，激发波长265
m，发射波长360
m。
2结果与分析
21试验结果
f在草鱼、加州鲈鱼、对虾阴性样品中分别添加MG和LMG，添加浓度分别为05、15、25μgkg，每个添加水平设6个平行样。加标后按照“133”的方法提取、“134”的方法净化，在“135”色谱条件下上机分析，根据色谱图各组分的峰面积，计算相应加标浓度的平均回收率和相对标准偏差（RSD），加标回收结果见表1。阴性样品色谱见图2，LMG加标色谱见图3，MG加标色谱见图4。
配制浓度为1、2、4、16、30、100μgL标准工作液，按“135”色谱条件进样测定，得到浓度（μgL）与峰面积线性回归方程为y29773×105x43752×102，R209993，在1～100μgL线性良好。按信噪比SN≥3为检测限，测得检测限为040μgkg。
22前处理优化
按照GBT1985720055、GBT2036120066的提取方法称取500g已绞碎样品至离心管中，加入提取剂超声提取后再匀浆提取。但试验发现，由于提取剂中主要成分是乙腈，能使样品中蛋白质变性，粘在匀浆机刀头上，即便多次洗刀头也很难洗净，尤其在蛋白质含量丰富的虾样前处理过程中特别严重。多次清洗刀头、匀浆过程中提取剂飞溅损失，都会严重影响回收率10。因此，将匀浆提取改为超声提取。
按照GBT203612006的方法共提取了4次，提取3次MG和LMG回收率为80～90提取第4次时在液液萃取净化出现有机相和水相混溶、倒置，造成回收率低，平行极差，回收率相对前3次反而降低，甚至无法检出。刘少r