红血球凝集反应（简称间接血凝）是间接凝集反应中应用最广的一种方法。（一）原理以红血球为载体的间接凝集反应叫做间接血凝。将抗原吸附在红血球上用以检测微量抗体称为正向间接血凝，以抗体吸附于红血球上，检测相应的抗原，称为反向间接血凝。用抗原吸附红血球，一般比较容易，但用免疫血清吸附红血球，则困难得多，而且往往不易获得良好的结果，因为免疫血清中的成分非常复杂。许多其他蛋白质和非抗体活性的免疫球蛋白占据红血球的表面，而影响血球的特异性凝集。（二）材料与试剂1．红血球2．反应板分聚苯乙烯塑料板和有机玻璃板（聚甲基丙烯酸甲酯），每板又有96孔和72孔两种规格。按孔型又可分为V和U型两种，V型具有更典型的凝集模型，U型有时比V型的血清效价高1～2孔。反应板不能煮沸消毒和浸泡于来苏儿水中。消毒可用05％甲醛溶液，1％新洁尔灭及紫外线照射等。
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f3．稀释棒由合金制成。棒头有8条沟，吸液量为0025ml，通过火焰，使表面氧化变粗易于吸取液体。它的作用是蘸取、转移、混合液体。为了长期保持棒头的氧化层，每使用20次左右，应过火焰一次。4．标准滴管每滴0025ml。5．微型振荡器6．兔血清盐水作为稳定剂，用于悬浮致敏红血球以及稀释供试血清。制法为：无菌采取兔血，收集血清，灭活后4℃保存。同时，取所需量加4倍量的25％血球悬液，混匀，37℃水浴10mi
，以吸附异嗜性凝集素，离心后取上清；再以pH72PBS稀释成1％兔血清盐水，冰箱保存可供数日内之用。7．抗原尽可能使用高纯度的抗原。8．供试血清或其它含抗体材料供试血清必须灭活，加9倍25％的红血球悬液，37℃水浴10mi
～20mi
，进行吸收，然后离心，取上清，即为110的血清稀释液。9．醛化剂甲醛、戊二醛、丙酮醛等。10．优质鞣酸11．015MolLpH64PBS液，用于红血球致敏。12．015MolLpH72PBS液，用于一般稀释液。13．002％牛血清白蛋白PBS液14．生理盐水（三）红血球的处理1．新鲜红血球新鲜红血球用阿氏液保存于4℃，可供3周内使用。采用新鲜红血球做凝集反应，模型新鲜，典型，而且敏感性也比醛化红血球高出1～2个滴度。但用新鲜红血球致敏后，保存时间短，而且不同动物个体和不同批次来源的红血球均有差异，影响试验结果和分析。为了克服这一缺点，目前多采用醛化红血球或鞣化红血球。2．红血球醛化极其优点（1）醛化方法：常见的醛化剂有甲醛、戊二醛和丙酮醛。甲醛醛化过程：①将红血球用pH72PBS反复洗涤4次，以除去血清蛋r