施验证的人员必须已经接受本方案的培训且考核合格。见附表1。
72验证前准备
721菌种
7211试验微生物以金黄色葡萄球菌作为细菌繁殖体中化脓性球菌的代表；大肠杆
菌作为细菌繁殖体中肠道菌的代表；白色念珠菌作为致病性真菌的代表。在上述规定的
菌、毒株的基础上，根据消毒剂特定用途或试验特殊需要，还可增选其他菌、毒株。
721275乙醇、2甲酚皂为中效消毒剂，01新洁尔灭为低效消毒剂，均不具备
杀灭细菌芽孢功能，根据上述内容，本次验证所用菌种见下表：
序号
名称
序列号
类别
1
金黄色葡萄球菌
CMCCB26003
细菌
2
大肠埃希菌
CMCCB44102
细菌
4
白色念珠菌
CMCCF98001
真菌
7213可接受标准：标准菌种必须来源可靠、来源可溯、保存方法与条件合适。使
用的标准菌种不能超过第五代。
7214应确认菌种名称、来源、代数，见附表2。
722试剂及培养基
7221选用培养基见下表：
序号
名称
备注
f420
1
营养琼脂培养基
121℃，15mi
灭菌备用
2
玫瑰红钠琼脂培养基
121℃，15mi
灭菌备用
3
胰酪胨大豆琼脂培养基
121℃，15mi
灭菌备用
7222稀释液、冲洗液：09无菌氯化钠溶液、pH70氯化钠蛋白胨缓冲液。
7223可接受标准：所有试剂、培养基的规格、数量和保存条件满足要求，且在有
效期内；脱水培养基呈流动粉末状，无结块，无潮解，且在有效期内。
7224试剂培养基检查确认记录见附表3。
73消毒剂配制：
按《清洁剂、消毒剂的配制与使用标准操作程序》进行消毒剂配制。
74定量悬浮试验
741目的：01新洁尔灭溶液、75乙醇溶液、2甲酚皂溶液消毒效力的确认（定
量悬浮试验法）。
742菌液制备：取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌接种于营养肉汤培养基中，于30～
35℃培养18～24h即得，培养后微生物浓度应不少于105cfuml。取白色念珠菌接种于改
良马丁液体培养基中，于23～28℃培养24～48h即得，培养后微生物浓度应不少于
105cfuml。
743将配制好的01新洁尔灭溶液（或75乙醇溶液或2甲酚皂溶液）按9ml支
分注于27支无菌具塞试管中，按照“5分钟组”、“10分钟组”和“15分钟组”共3组每组9
支，进行分组编号。
744取供试菌液（105cfuml的金黄色葡萄球菌菌液，105cfuml的大肠埃希菌菌液，
105cfuml的白色念珠菌菌液）1ml按照下表，分别接入到盛有9ml01新洁尔灭溶液（或
75乙醇溶液或2甲酚皂溶液）的试管中（已进行10倍稀释），轻轻摇动，混合均匀，
并立即开始计时。
菌种名称
5分钟组
10分钟组
15分钟组
金黄色葡萄球菌1mlr