容量大、稳定和无插入突变危险等特点，已经成为基因转导研究中应用最多的载体之一。Yagi等［5］将腺病毒携带的GDNF基因从圆窗膜注射入鼓阶，GDNF基因在蜗内得到表达并发挥作用。
基于上述研究状况和现有研究工作基础，本项目组拟将利用基因治疗的独特性和内耳可行局部治疗的独特解剖特点，对自身免疫性感音神经性聋模型动物进行内耳免疫抑制或调节基因的试验性治疗研究，以探讨其治疗效果和可能发生的副反应情况。
1材料和方法11实验动物健康成熟豚鼠，白色红目，体重300g左右，耳廓反应正常，耳镜检查排除中耳疾患，所有动物均由南京青龙山养殖场提供。12内耳组织粗制抗原（crudei
ereara
tige
s，CIEAgs）制备豚鼠CIEAgs制取方法参考文献［4］，主要步骤：将豚鼠清醒断头，取出颞骨，快速打开听泡，在解剖显微镜下分离全膜迷路，包括基底膜、螺旋韧带、膜半规管、椭圆囊和球囊（祛除耳石器），放入001molL1pH74PBS中，经研磨、冻溶、超声粉碎、匀浆、离心（1000rmi
1，5mi
）后取上清液，采用紫外分光光度计测定蛋白含量，分装后低温干燥制成CIEAgs干粉备用，保存于80℃冰箱。13ASNHL动物模型制备首次免疫每只动物采用CIEAgs400mg（04ml）1，加等量完全弗氏佐剂，注射于右后足垫；2周后
f以CIEAgs200mg（04ml）1加等量不完全弗氏佐剂，注射于背部多点皮下；间隔2周后，再同样强化免疫1次。依据听觉诱发电位Ⅲ波的阈值升高（超过免疫前全部动物均值加2倍标准差）和出现针对CIEAgs特异性抗体（ELISA法，波长490
m时A值超过免疫前全部动物均值加2倍标准差），判断为ASNHL模型动物制备成功［6］。
14实验设计ASNHL模型动物共28只，按配对设计分为4组，每组7只：A、B和C组分别向鼓阶内注入携带FasL基因的重组腺病毒AdFasL、携带IL10基因的重组腺病毒AdIL10和携带绿色荧光蛋白的腺病毒AdGFP；D组即对照组用同样方法仅向鼓阶内注射磷酸盐缓冲液。15重组基因载体鼓阶内注射末次免疫后2周进行。豚鼠用1的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉（30mgkg1）后，在耳廓后方作一长3～4cm弧形切口，显露听泡，用微型电钻打开听泡，暴露耳蜗底转，用针尖轻轻磨薄耳蜗鼓阶侧壁的骨壁，钻一针尖大小的孔，用微推进器将小儿头皮针的针尖（针尖斜面已打磨变小）插入鼓阶，深度不超过1mm，先抽取少量（约10μl）的外淋巴液，再用微量注射机将重组腺病毒或腺病毒液缓慢（1μlmi
1）注入鼓阶，A组给予AdFASL（病毒滴度为25×1010pfuml1）20μl，B组给予AdIL10（病毒滴度为10×108pfur