过程中遵循
③若Ⅱ3和Ⅱ4家庭与Ⅱ6和Ⅱ7家庭都生有一患病女孩和一正常男孩，则两男孩基因型相同的概率为。
30．（9分）下图表示含有目的基因D的DNA片段长度（bp即碱基对）和部分碱基序列，图右表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有MspI、BamHI、MboI、SmaI4种限制性核酸内切它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。
1若用限制酶SmaI完全切割图中含有目的基因D的DNA片段，其产物长度分为。若图左DNA分子中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换，
那么基因D就突变为基因d。从隐形纯合子中分离出图示对应的DNA片段，用限制酶SmaI完全切割，产物中共有种不同长度的DNA片段。
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f2为了提高试验成功率，需要通过
技术扩增目的基因，以获得目的基因的大量
拷贝。在目的基因进行扩增时，加入的引物有A、B两种，若该目的基因扩增
代，则其中含有A、B引物的DNA分子有个。
3若将图右中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。
4为了筛选出成功导入含目的基因D的重组质粒的大肠杆菌，首先将大肠杆菌在含的培养基上培养，得到如图示的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含的培
养基上培养，得到如图2的结果（空圈表示与图1对照无菌落的位置）。挑选目的菌的位置为。
5若目的基因在工程菌中表达产物是一条多肽链，如考虑终止密码，则其至少含有的氧原子数为。
318分）烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。1获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有、氮源、生长因子、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。法接种
至50℃时，在
2检测绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用
于固体培养基表面，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的小滤纸圆片均匀置于该平板上的不同位置，适宜条件培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗r