土壤蛋白酶活性测定方法：铜盐比色法
（一）方法原理本法基于以精胶为基质，酶解后所释放的氨基酸使其与铜盐反应形成蓝色复
合物。用比色测定颜色深度，计算出氨基酸含量，来度量酶的活性。（二）试剂
1）1精胶2）甲苯3）铜磷酸盐溶液：①273gCuCl2H2O溶于1L水；②645gNa2HPO412H2O溶于500mL水，加入72gNaOH，稀释至1L；③5721gNa2B4O7溶于15L水，加入100毫升01molLHCL稀释至2L，使用按照1：2：2的体积分数前将上述①、②、③混合。4）甘氨酸标准溶液的配制：取2679mg甘氨酸溶于蒸馏水，稀释至1L（1mL含50gNH3N）。（三）操作步骤（1）标准曲线绘制取0、5、10、15、20mL甘氨酸标准溶液，用蒸馏水加至20mL，然后加入20mL新配制的铜磷酸盐溶液。显色后，用分光光度计在650
m处测定，绘制标准曲线。（2）土壤蛋白酶活性测定称取5g土壤置于100mL三角瓶中，加入甲苯2mL，放置15mi
，加入20mL1精胶溶液，于37℃恒温培养24h，于此同时，以水代替基质作为对照。培养结束后，将悬液过滤，取10mL滤液，加水10mL，铜磷酸盐溶液20mL。显色后，用分光光度计在650
m处测定，根据标准曲线求出NH3N含量。以每克土壤在37℃下24h内酶解蛋白质释放的NH3N的质量（g）表示蛋白酶活性。
f土壤蔗糖酶测定方法：35二硝基水杨酸比色法
分析意义：对增加土壤中易溶性营养物质起着重要作用，蔗糖酶与土壤许多因子有相关性，如与土壤有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度有关，一般情况下，土壤肥力越高，蔗糖酶活性越高。（一）方法原理
蔗糖酶酶解所生成的还原糖与35二硝基水杨酸反应而生成橙色的3氨基5硝基水杨酸。颜色深度与还原糖量相关，因而可用测定还原糖量来表示蔗糖酶的活性。（二）试剂
1）酶促反应试剂：基质8蔗糖，pH55磷酸缓冲液：115M磷酸氢二钠（11876gNa2HPO42H2O溶于1L蒸馏水中）05ml加115M磷酸二氢钾（9078gKH2PO4溶于1L蒸馏水中）95ml即成，甲苯
2）葡萄糖标准液（1mgmL）预先将分析纯葡萄糖置80℃烘箱内约12小时。准确称取50mg葡萄糖于烧杯中，用蒸馏水溶解后，移至50mL容量瓶中，定容，摇匀（冰箱中4℃保存期约一星期）。若该溶液发生混浊和出现絮状物现象，则应弃之，重新配制。3）35二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）称05g二硝基水杨酸，溶于20ml2N氢氧化钠和50ml水中，再加30g酒石酸钾钠，用水稀释至100ml（保存期不过7天）（三）测定步骤（1）标准曲线绘制分别吸1mgmL的标准葡糖糖溶液0、01、02、03、04、05mL于试管中r