2土壤蛋白酶活性的测定21甘氨酸标准曲线的绘制1分别吸取0，01，02，005，12和5mL甘氨酸标准溶液置试管中，加蒸馏水至5mL。各加入1mL2茚三酮溶液摇匀，在煮沸的水浴上加热10mi
。将显色溶液转入50mL容量瓶中，稀释至刻度。2在光电比色计上用1cm比色杯于560
m波长处以不含甘氨酸的溶液为对照比色测定各含甘氨酸溶液的光密度。以含甘氨酸溶液的浓度为横坐标，光密度为纵坐标绘制甘氨酸的标准曲线。22蛋白酶活性测定方法称取2g风干土两份，分别置试管中，加入05mL甲苯，摇匀后放置15mi
。另取一个试管不加土样和甲苯作为无土对照。在一个加土样试管和无土对照试管加入10mL1白明胶溶液，另一个加土样试管加10mL蒸馏水代替白明胶溶液作为无基质对照。将试管塞紧，小心摇匀。置30℃恒温箱中培养24h。培养结束后，将试管中悬液用滤纸过滤至另一试管中。吸取5mL滤液于试管中，加05mL005molL硫酸和3mL20硫酸钠沉淀蛋白质，再次过滤。在上述滤液中加入1mL茚三酮溶液，仔细摇匀，在煮沸的水浴上加热10mi
。将显色溶液转入50mL容量瓶中，稀释至刻度。按照测定甘氨酸标准曲线的方法比色测定各样品的光密度。根据所测光密度值在甘氨酸标准曲线上查出对应的甘氨酸浓度。土样在测定过程中稀释了10倍（加入10mL白明胶溶液或蒸馏水），比色测定的样品体积时5mL，由各样品的甘氨酸浓度可以得出各土样中产生甘氨酸的毫克数。
3过氧化氢酶活性的测定过氧化氢酶活性的测定采用高锰酸钾滴定法，具体方法如下：称取5克过1毫米筛的风干土样，置于150毫升三角瓶中，注入40毫升蒸馏水和5毫升03过氧化氢。随即置于振荡器上振荡30分钟。然后注入5毫升15molLH2SO4过滤。取25毫升滤液，用001molL高锰酸钾滴定（保证在酸性环境下）。同时设置对照，即三角瓶中注入40毫升蒸馏水和5毫升03过氧化氢，而不加土样。重复三次。以单位土重消耗001molL高锰酸钾的毫升数来表示过氧化氢酶的活性。5H2O22KM
O44H2SO45O22KHSO48H2O2M
SO4
f6土壤脱氢酶的测定1）方法原理脱氢酶能酶促脱氢反应。在土壤中，糖类和有机酸的脱氢作用比较活跃，可以作为氢的供体。常用测定方法有TTC和INT法，TTC和INT被还原后，能形成脂溶性的红色产物。现介绍TTC法，它受氢后生成红色的三苯基加簪（TPF）。2）试剂（1）TTC。（2）甲苯（3）02molLTrisHCl缓冲液（pH76）：385mL02molLHCl与50mL02molLTri溶液混合，用蒸馏水稀释至1000mL。（4）10％Na2S溶液。（5）TTC标准溶液：称取5r