，再补加蒸馏水至1mL，加DNS试剂3mL混匀，于沸水浴中准确反应5mi
（从试管放入重新沸腾时算起），取出立即泠水浴中冷却至室温，以空白管调零在波长540
m处比色，以OD值为纵坐标，以葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。（2）土壤蔗糖酶测定称取5g土壤，置于50mL三角瓶中，注入15ml8蔗糖溶液，5mlpH55磷酸缓冲液和5滴甲苯。摇匀混合物后，放入恒温箱，在37℃下培养24h。到时取出，迅速过滤。从中吸取滤液1ml，注入50ml容量瓶中，加3mlDNS试剂，并在沸腾的水浴锅中加热5mi
，随即将容量瓶移至自来水流下冷却3mi
。溶液因生成3氨基5硝基水杨酸而呈橙黄色，最后用蒸馏水稀释至50ml，并在分光光度计上于508
m处进行比色。为了消除土壤中原有的蔗糖、葡萄糖而引起的误差，每一土样需做无基质对照，整个试验需做无土壤对照。（3）结果计算
f葡萄糖（毫克）a×4式中，a从标准曲线查得的葡萄糖毫克数
4换算成1g土的系数
纤维素酶
分析意义：纤维素是植物残体进入土壤的碳水化合物的重要组分之一。在纤维素酶作用下，它的最初水解产物是纤维二糖，在纤二糖酶作用下，纤维二糖分解成葡萄糖。所以，纤维素酶是碳素循环中的一个重要的酶。分析方法：硝基水杨酸比色法试剂：1羧甲基纤维素溶液，pH55磷酸盐缓冲液：由006MKH2PO4和Na2HPO4溶液混合制成，甲苯，35二硝基水杨酸溶液：称05g二硝基水杨酸，溶于20ml2N氢氧化钠和50ml水中，再加30g酒石酸钾钠，用水稀释至100ml（保存期不过7天），葡萄糖标准溶液：分别吸1mgmL的标准葡糖糖溶液0，01、02、04、06、08mL于试管中，再补加蒸馏水至1mL，加DNS溶液3ml混匀，于沸腾水浴中加热5mi
，取出立即泠水浴中冷却至室温，以空白管调零在波长540
m处比色，以OD值为纵坐标，以葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线。操作步骤：称10g土壤置于50ml三角瓶中，加20ml1羧甲基纤维素溶液、5mlpH55磷酸盐缓冲液及15ml甲苯，将三角瓶放在37℃恒温箱中培养72h。培养结束后，过滤并定容25ml。取1ml滤液，然后按绘制标准曲线显色法比色测定。每一实验处理均应设置以5ml水代替DNS基质的对照，为检验试剂纯度应设无土壤的对照。
纤维素酶活性以72h，10g土壤生成葡萄糖毫克数表示。
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