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块塑好后将其粘在小木块上。
注意要粘牢。最后在木块侧面用铅笔记上组织块名称、编号。
切片时采用手摇连续切片机。使用切片机进行切片时,将蜡块固定在切片机上,调好距离和
所要求的切片厚度,然后用右手摇动手柄,即可进行切片了。一般来讲生物切片的厚度在5~
10微米。
对于切下的切片不要用手去取,因为体温可以使蜡片粘到手上,正确的做法是用毛笔或牙签
挑取,然后放在载玻片上进行展片和粘片。
8.展片和粘片
切下的组织蜡片往往带有皱褶,所以在染色前必须进行蜡片的展片和粘片,即把切好的蜡片
平整的粘在载玻片上。展片的温度因石蜡熔点的不同而的不同,一般的56~58℃的石蜡切
片℃的温水进行展片,48~52℃的石蜡切片用35℃的温水进行展片。等到蜡片充分展平后,
取一清洁载玻片,载玻片上涂一薄层蛋白甘油,然后在水中捞取蜡片,捞完后将蜡片摆正,
放到格盘内,置38℃温箱中烘干,然后即可进行染色。
展片和粘片比较简单容易做,但是如果处理不好则无法进行染色,即使能染上色,组织切片
内部的结构也往往被破坏。
9.染色和封固
采用苏木精伊红对染法(HE)染色结果是细胞核为紫色,细胞质为粉红色;苏木精伊红染
f色法整个染色过程如下:取已经干燥的切片,放于盛有二甲苯的染缸内脱蜡10mi
左右,这个过程称为脱蜡。脱完蜡后的切片即可进行染色,具体染色过程和时间如下:(1)100%酒精洗去二甲苯2~5mi
。(2)95%酒精2~5mi
。(3)90%酒精2~5mi
。(4)80%酒精2~5mi
。(5)70%酒精2~5mi
。(6)50%酒精2~5mi
。(7)蒸馏水洗2~5mi
。(8)苏木精染液10~20mi
。(9)普通水洗1mi
。(10)盐酸酒精分色数秒~半mi
(70%酒精100mL+盐酸1mL),分色到切片为带粉红色后立即取出。(11)自来水冲洗数hr。镜检切片呈清朗的蓝色,细胞核非常明显。(12)蒸馏水洗1mi
。(13)50%酒精2~5mi
。(14)70%酒精2~5mi
。(15)80%酒精2~5mi
。(16)伊红酒精溶液对比染色2~5mi
(95%酒精+05g伊红)。(17)95%酒精2~5mi
。(18)无水酒精Ⅰ3mi
。(19)无水酒精Ⅱ3mi
。(20)无水酒精加等量二甲苯2mi
。(21)二甲苯数mi
到透明为止。(22)自二甲苯中取出切片,放在格板内,滴少量的树胶于组织片中央。(23)取一盖玻片,轻轻以盖玻片的一边接近载玻片,然后迅速放下盖玻片,树胶即迅速扩张到四周,校正好盖玻片方向。将封好的切片放置在恒温箱中干燥。最后,将干燥好的切片上的浮色擦净,并在玻片的左端粘上标签,注明组织切片的名称r
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