小鼠部分组织的石蜡切片制作一、实验原理：利用脱水剂除去组织中的水分，再用透明剂二甲苯可以去除脱水剂酒精，而二甲苯可以溶解石蜡并将其导入到已脱水的组织细胞中，然后用熔化的石蜡对组织进行包埋，冷却后即可将柔软的组织包埋在石蜡中，使其具有一定硬度，且不改变其大小和形状。用旋转切片机可将其切为极薄的薄片，经染色、脱水、装片后在显微镜下可以清晰地观察其组织结构。二、材料与用具1．材料：小鼠肝脏、脾脏等。2．用具：溶蜡箱、蜡杯、不同熔点的石蜡、酒精灯等。三、实验内容与步骤1．取材及固定取小鼠，采用拉颈处死或麻醉处死法将其杀死，取其脾脏和肝脏，切为边长约为05cm的组织块。用先用085％的生理盐水漂洗以洗去血液与污渍，如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净，可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次，使其管腔冲洗干净，切忌不可用刀或其他器具刮之。由动物身上切取的组织必须是新鲜的，材料越新鲜越好，一般不应超过死后24hr。如果是管状器官或是其中有分泌之消化液，则死后应迅速采取，以免组织自溶或上皮剥落。取下的材料马上进行固定，采用FAA固定液，固定液的用量与组织块体积之比一般在201，固定时间2hr以上，超过24hr时可继续浸泡或转入70酒精中保存。不应使组织块贴于容器壁上，应记录固定液的名称，材料的种类，动物品种及开始固定的时间。2．冲洗固定后的组织块在进行脱水前用70酒精洗去固定液。3．脱水和硬化经过固定后的组织在水洗后要进行脱水，脱水的目的将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，使组织逐渐变硬，便于油类或其他透明及浸入，为熔化的石蜡浸渗到组织中创造条件。常用的脱水剂是不同浓度的酒精，因为酒精与水有很大的亲和力，酒精浓度可以逐渐升高，置换出组织中的水。脱水必须充分，脱水不充分会影响透明和浸蜡。脱水过程要逐级上升，不能操之过急，跳级脱水会引起组织块强烈的收缩变形。脱水所用的酒精浓度及过程如下：30％→50％→70％→80％→90％→95％→100％Ⅰ→100％Ⅱ组织块在各级较低浓酒精（小于70％）中脱水的时间应视组织块的大小而定，大小不超过05立方厘米的组织块脱水时间为6～12hr，在高浓度酒精中（大于70％）脱水时间为3hr左右。组织块在无水酒精中需经过两次处理，以保证脱净水分。由于无水酒精有使组织变脆的缺点，故在无水酒精中脱水的时间不宜过长，一般应在15～30mi
左右。在脱水瓶中酒精的量与组织块之比约为501。简化步r