骤如下:70(一夜)80(1hr)90(30分)95(30分)100(15分)酒精二甲苯(15分)二甲苯(3分)石蜡二甲苯(30分)石蜡(80分)4.透明透明是石蜡切片法切片前必经的一步。其目的在于用矿物油或植物油等透明剂置换出无水酒精,以便于熔化的石蜡浸渗到组织间隙中,故透明剂必须是能分别与石蜡和酒精相溶的。经过透明剂处理的组织块用肉眼对光观察呈透明现象,所以这个过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、苯、甲苯等,这些都是穿透力强易使组织变脆的透明剂,因此透明的时间宜短,一般在20mi
即可。
f透明时组织块由无水酒精中取出,先放入二甲苯和无水酒精等量混合的溶剂中1hr左右,
然后取出放入纯二甲苯中20mi
即可。
5.浸渗
浸渗过程是使包埋组织用的物质深入到所有的组织间隙中,然后再通过各种方法使这种物质
凝固,而将组织材料包埋其中。
石蜡切片法和火棉胶切片法都需要浸渗过程。石蜡切片法是将加热的石蜡渗到组织中而火棉
胶切片法是使火棉胶渗到组织间隙中去。
在浸渗前要先将选好的石蜡分别以容器装好放在恒温箱中,使其杂质沉淀。石蜡最好选用软
蜡和硬蜡两种,软蜡熔点为45~50℃之间,硬蜡熔点为56~58℃之间,60~62℃的硬蜡很
少用。冬天室温较低时多用软蜡,夏天室温较高时多用硬蜡。浸渗应在自动恒温箱中进行。
组织块在各个蜡杯中浸蜡的时间如下:
软蜡1
30mi
软蜡2
30mi
硬蜡1
30~60mi
硬蜡2
60~120mi
这一时间不是固定不变的,应视组织块的种类及大小而相应延长或缩短浸蜡时间。浸蜡的总
时间一般为:05立方厘米的组织块时间为6~8hr;02~03立方厘米的组织块时间为3~5
hr;01~02立方厘米的组织块时间为2~3hr。当发现蜡杯中有灰尘或组织碎块时应使其沉
淀或过滤后再使用。浸蜡不透包埋后会出现白色不透明部分,此时需要在浸蜡一次。
6.包埋
包埋就是将已经浸渗好的组织块包埋于浸渗剂中,石蜡包埋法如下。
浸蜡终了时,将预先预热好的和第四杯石蜡相同熔点的石蜡倒入折好的蜡槽内,然后从第四
个蜡杯中取出组织块,放入蜡槽内,摆好位置,注意组织切面的摆放方向。放好组织后可以
自然冷却,也可以放入冷水中直接冷却。
7.修块和切片
取已经包埋好的蜡块,将纸盒拆下,用加热的刀片或解剖刀将其分成若干块(每块组织占一
块),用解剖刀将组织块周围多余的石蜡切去,注意不要切到组织。把有组织的蜡块修成正
方形或梯形。在进行塑型时一定要注意组织块切面的方向。蜡r