的。它包括了标本对照与试剂对照，通过对照确认样本和试剂是否受到感染。2阳性对照：它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好、经鉴定是该产物的标本。但阳性对照其对检测或扩增样品污染的可能性很大。因而当某一PCR试剂已经使用稳定，检验人员完全掌握时，在之后的实验中应尽可能免设阳性对照。来减小污染概率。3选择不同区域的引物进行PCR扩增。4重复性试验。
二、防止污染的方法1合理分隔实验室：将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增以及PCR产物的鉴定等步骤进行分区或者分室，尤其要将样本处理和PCR产物的鉴定与其它步骤严格分开。理想的分区为，标本处理区、PCR反应液制备区、PCR循环扩增区、PCR产物鉴定区。
RealtimePCR实验攻略
实验中必须坚持的一些好习惯
1加入试剂之前，把它混匀一下，以免放置时间长了浓度不均。
2移液枪用完之后要归到最大计量的位置，防止久而久之弹簧失去弹性。
3所有的试剂都自己配，出了问题才好找原因一防止RNA酶污染的措施。
一、防止RNA酶污染的措施
1所有的玻璃器皿均应在使用前于180℃的高温下干烤6h或更长时间。
f2塑料器皿可用01DEPC水浸泡或用氯仿冲洗（注意：有机玻璃器具因可被氯仿腐蚀，故不能使用）。
3有机玻璃的电泳槽等，可先用去污剂洗涤，双蒸水冲洗，乙醇干燥，再浸泡在3H2O2室温10mi
，然后用01DEPC水冲洗，晾干。
4配制的溶液应尽可能的用01DEPC，在37℃处理12h以上。然后用高压灭菌除去残留的DEPC。不能高压灭菌的试剂，应当用DEPC处理过的无菌双蒸水配制，然后经022μm滤膜过滤除菌。
5操作人员戴一次性口罩帽子手套，实验过程中手套要勤换。
6设置RNA操作专用实验室，所有器械等应为专用。
动植物总RNA提取Trizol法
Trizol法适用于人类动物植物微生物的组织或培养细菌，样品量从几十毫克至几克。用Trizol法提取的总RNA绝无蛋白和DNA污染。RNA可直接用于Norther
斑点分析，斑点杂交，PolyA分离，体外翻译，RNase封阻分析和分子克隆。
在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA制备工作。若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于80℃冷冻柜。在制备RNA时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase的作用。
1将组织在液N中磨成粉末后，再以50100mg组织加入1mlTrizol液研磨，注意样品总体积不能超过所用Trizol体积r