的特异性抗体或抗原。3重复性好：由于其试剂稳定易保存操作简便结果判断较客观等因素目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域ELISA的原理待测2待测2
f1抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附并保持其免疫学活性。2抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性。3酶结合物与相应抗原或抗体结合后可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的因此可以按底物显色的程度显示试验结果。ELISA的类型1直接法：检测抗原A将抗原吸附在载体表面；B加酶标抗体，形成抗原抗体复合物；C加底物。底物的降解量＝抗原量。2间接法：检测抗体A将抗原吸附于固相载体表面；B加抗体形成抗原抗体复合物；C加酶标抗体；D加底物。测定底物的降解量＝抗体量。3双抗体夹心法：检测抗原A将抗原免疫第一种动物获得的抗体吸附于固相表面；B加抗原，形成抗原抗体复合物；C加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物；D加酶标抗抗体第二种动物抗体的抗体；E加底物。底物的降解量＝抗原量。4竞争法：测定抗原A将抗体吸附在固相载体表面；B对照只加入酶标抗原；C加入酶标抗原和待测抗原，竞争结合抗体；D加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知抗原量。我们今天所用到的方法就是间接法。间接法的基本流程如下。SRBC冻融稀释→包被液每孔100ul→4C过夜→弃液→加封闭液每孔200ul→37C温箱孵育45mi
→弃液→洗板3次→阳性对照，阴性对照，1：10和1：100稀释血清每孔100ul→37C温箱孵育45mi
→弃液→洗板3次→加入酶标二抗每孔100ul→37C温箱孵育1h→弃液→洗板3次→加入底物AB各100ul→室温避光反应10mi
→每孔加入终止液100ul→目测观察或酶标仪检测。等样品孵育结束，需要弃去孔中液体，将酶标板中液体甩入水池，滴管滴入约200ul洗液，注意不要溢出，1分钟后甩出，滤纸拍干，重复洗板3次。注意不要将板条折断。然后加入HRP标记抗体，每孔100μl，收集入珐琅盘，置于37℃温箱孵育45mi
～1小时。注意事项1封闭时注意将封闭液加满各反应孔，并去除各孔中可能产生的贴孔壁气泡。2加洗涤液时，每孔加满，但不要溢出。
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加不同样品时更换枪头每次洗涤液在孔中的停留时间不应少于1分钟。洗涤后板要甩干，不要残留液体。r