是2molL硫酸。
f实验步骤1样品血清1：10和1：100稀释分别为待测1和待测2。在标记好的EP管中加入10ul血清，然后加入990ul样品稀释液。另外一个EP管中加入50ul血清，然后加入450ul稀释液。2将待测样品1和2分别如下图加入酶标板中，同时加入阳、阴性对照液，每孔100μl。3收集在有湿纱布的珐琅盘里，盖好酶标板盖子，放入37℃温箱孵育1h。待测1待测14每组派一个代表到前面领取血清和酶标板进行操作。二、学生稀释样品及加样（8：20－8：35，15分钟）三、温箱孵育（8：35－9：20，45分钟）ELISA是在免疫酶技术immu
oe
zymatictech
iques的基础上发展起来的一种免疫测定技术，既可以定性也可以定量。主要过程包括抗原抗体吸附在固相载体即聚苯乙烯微量滴定板上称为包被，也就是第一次课用绵羊红细胞抗原包被酶标板。这样绵羊红细胞抗原就会吸附在反应孔内壁。通过洗涤，可以将不牢固的抗原洗脱。然后用封闭液将空余的位点占据，以避免非特异性吸附。洗涤后加待测抗体抗原再加相应酶标记抗体，形成抗原抗体待测抗体抗原酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体抗原的量。洗涤的重要性：由于抗原抗体的反应在一种固相载体聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行每加入一种试剂孵育后可通过洗涤除去多余的游离反应物从而保证试验结果的特异性与稳定性。ELISA的优点1敏感性高：灵敏度可达
g水平，当与生物素亲和素系统结合，可使检测极限达到pg水平，从而使体液中的微量蛋白，包括几乎所有与免疫密切相关的细胞因子，均可被定量检测。亲和素是一种糖蛋白，可由蛋清中提取。分子量60kD，每个分子由4个亚基组成，可以和4个生物素分子亲密结合。现在使用更多的是从链霉菌中提取的链霉和素（strepavidi
）。生物素（bioti
）又称维生素H，分子量24431，存在于蛋黄中。用化学方法制成的衍生物，生物素－羟基琥珀亚胺酯（bioti
hydroxysucci
imide，BNHS）可与蛋白质、糖类和酶等多种类型的大小分子形成生物素化的产物。亲和素与生物素的结合，虽不属免疫反应，但特异性强，亲和力大，两者一经结合就极为稳定。由于1个亲和素分子有4个生物素分子的结合位置，可以连接更多的生物素化的分子，形成一种类似晶格的复合体。因此把亲和素和生物素与ELIS偶联起来，就可大提高ELISA的敏感度。）2特异性强：将抗原抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化作用原理有机地结合起来可敏感地检测体液中微量r