、九、十月环境检测沉降菌平板上连续检出科
氏葡萄球菌，特选此菌为环境菌种）
需验证的消毒剂应质量合格并在有效期即将结束时开始验证试验，实验所用的仪器设备均在校正合格期限内。
53实验程序
531消毒剂的配置：消毒剂按照相关的程序进行稀释，配置好的消毒剂溶液储存在实际操作时使用的喷壶中，在有效期内（7天）每天模拟日常使用方法使用，第8天开始验证试验。消毒剂配置方法及消毒反应时间见表2
532材质的准备：所需的材质均是在实际操作中消毒剂所消毒的表面材质，准备的材质需为无菌材质，在实验过程中，每个实验组需3块同种材质同时进行。
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Qualificatio
ofDisi
fecta
tEffective
essa
dStability
TMP07077
表2消毒剂配置方法及消毒反应时间
消毒剂
稀释比例
ProcessLpHse酸性
1256vv
ProcessVesphe
eⅡse碱性
1128vv
Etha
ol酒精溶液
75
快活溶液
110vv
反应时间3510mi
utes3510mi
utes235mi
utes3510mi
utes
菌种大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌大肠埃希菌金黄色葡萄球菌白色念珠菌科氏葡萄球菌
533菌悬液的制备：
取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌及环境菌种科氏葡萄球菌的营养琼脂斜面培养物，接种至营养琼脂斜面上，在3537℃培养2022小时。再接种上述菌种的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，在3537℃培养1824小时，上述营养肉汤培养物用09无菌生理盐水溶液逐级10倍稀释，制成每01ml含菌落数104105CFU的菌悬液。
534实验操作：
准备3块待测表面材质于生物安全柜内，分别吸取01ml104105CFU接种于3块待测表面材质上，让其在生物安全柜中自然风干后待测，将配置好的的消毒装入喷壶中，均匀地喷洒在材质的表面后立即开始计时，按表2等计时结束后，迅速把该材质放入100ml的DE中和液中，充分振荡1mi
后经045微米的滤膜过滤，用100ml次的DE中和液冲洗3次，取滤膜放在DE中和琼脂平板上培养。培养条件：大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌及环境菌种科氏葡萄球菌在3035℃，至少3天，重复以上实验操作3次，完成验证实验。
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Qualificatio
ofDisi
fecta
tEffective
essa
dStability
TMP07077
535阴性控制实验：100ml的DE中和液经045micro
的滤膜后，取滤膜放在DE中和琼脂平板上培养，培养条件：细菌3035℃，r