标记基因产物，选用适当的抗生素或试剂进行
f筛选，再用与传统杂交瘤技术相似的方法克隆出分泌人鼠嵌合抗体的细胞株。但这种抗体仍保留了原来鼠源抗体约30左右的鼠源性，可诱发人抗小鼠反应。为了进一步提高嵌合抗体的人源化，在嵌合抗体的制备过程中，又引进了重构抗体技术和表面重塑技术以进行人源化改造。重构抗体是与异源抗体和抗原的结合相关的，它分为互补决定区（简称为CDR）移植抗体和特异性决定残基（简称为SDR）移植抗体。CDR移植抗体将鼠源单抗上的6个CDR，通过分子克隆的方法，克隆到人抗体相应的框架区。仍残存少量异源基因，仍可引起免疫排斥反应。并不是整个CDR都参与抗原的特异性识别，在CDR区中仅一部分氨基酸残基与抗原结合，这些氨基酸残基决定抗体的特异性，称为SDR。SDR移植抗体仅将异源抗体CDR区内与抗原结合关系密切的SDR，移植到人抗体相应位置上，使人源化抗体的免疫原性进一步降低。但SDR移植抗体和CDR移植抗体一样存在亲和力和特异性降低的缺点。目前重构抗体是对鼠源性单抗人源化改造最常用、最基本的方法。而表面重塑抗体技术是对鼠抗体表面氨基酸残基进行人源化改造，在维持抗体活性并兼顾减少异源性基础上选用与人抗体表面残基相似的氨基酸进行替换。所替换的片段不应过多，对于影响侧链大小、电荷、疏水性，或可能形成氢键从而影响到抗体互补决定区构像的残基要尽量保留。到目前为止，治疗性单抗的商品市场基本由嵌合单克隆抗体主宰，虽然抗体人源化程度在不断提高，但是由于鼠源成分依然存在，并未完全解决鼠抗体的免疫原性问题，而且人源化程度较复杂，造价也比较高。
13全人源性单抗的制备
完全人源性抗体才是应用于治疗的最理想抗体，研究者已经创建了一系列方法来制备此抗体。主要包括噬菌体抗体库技术、核糖体展示技术、RNA多肽融合技术和基因工程小鼠制备全人抗体等四项技术。
131
噬菌体抗体库技术该项技术是迄今发展最成熟、应用最广泛的抗体库技
术。20世纪80年代Smith发现了可以分离基因的噬菌体展示技术。噬菌体展示技术建立在噬菌体外壳具有表达抗体蛋白编码片段能力的基础上。这项技术的基本原理是用基因工程技术克隆人抗体可变区的全套基因，然后将克隆的基因插入噬菌体抗体文库，从而使该异源分子呈现于噬菌体表面。制备方法如下：将抗原包被在固相介质上，加入待筛选的噬菌体颗粒与固定的抗原结合，获取结合的抗体，将未结合的抗体洗脱，从噬菌体库中筛选出针对特定r