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将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而对试样进行分析。
高效液相色谱法具备分离效能高、选择性高、检测灵敏度高、检测器的重复性好、线性范围宽、分析速度快、操作自动化等特点,可用于分离高沸点、相对分子质量大、热稳定性差的有机化合物,还可用于各种离子的分离分析。
1712高效液相色谱仪
高效液相色谱仪的主要部件有:贮液罐、高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪和数据处理装置。其基本的工作流程是:贮液罐中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱内,由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的吸附解吸的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来15。
1713高效液相色谱法的研究进展
葛宝坤12等采用高效液相色谱法快速测定鸡肉、鱼、虾中硝基呋喃类药物残留量,得到4种硝基呋喃类药物在3个不同水平的添加回收率为87~102,检出限分别为5gkg、2gkg、3gkg、2gkg。景立新16等采用高效液相色谱法,检测海虾中呋喃唑酮残留量,得到检测下限为10gkg回收率为897~947。
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f钦州学院本科毕业论文(设计)
耿金培17等用高效液相色谱法检测饲料中的四种硝基呋喃类药物,得到呋喃它酮、呋喃西林、呋喃妥因检出限为025mgkg,呋喃唑酮的检出限012mgkg,在添加浓度05~5mgkg水平时平均回收率大于70。刁石强18等用高效液相色谱法测定水产养殖底泥中呋喃唑酮残留量,得到回收率882~926,检出限为10gmL。王蕾19等采用乙腈提取饲料中4种呋喃类药物,结果表明4种硝基呋喃类药物加标回收率大于7098,呋喃西林、呋喃妥因、呋喃唑酮和呋喃它酮的检测限依次为0020、0020、0020和0100gmL。
172超高效液相色谱法(UPLC)
据文献报道,一般饲料中硝基呋喃类药物的分析方法主要局限于液相色谱法,高效液相色谱法耗时较长并且消耗的溶剂量大,经济效益不高。超高效液相色谱法,可以补充高效液相色谱法的不足,还可以改善峰型,达到更低的检出限。
彭莺20等人经MCX固相萃取小柱净化后用超高效液相色谱法测定,4种硝基呋喃类药物在01~25mgL均与对应峰面积呈良好线性关系,添加质量浓度为025mgkg、5mgkg和100mgkg时,回收率在796855之间,检r
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