采用的纤维素原料的分解能力。
【仪器、材料和试剂】1、菌种:纤维素酶产生菌,青霉菌2、培养基:(1)斜面培养基:麸皮5,琼脂2,28℃,56天(2)种子培养基:药媒3(北京中棉紫光生物科技公司,药媒2206,蛋白54)麸皮3、磷酸二氢钾025、微晶纤维素2、胰蛋白胨04硫酸铵02、硫酸镁003、氯化钙003、种子28℃,160180rmi
,培养12天,10接种量接入发酵瓶(3)发酵培养基:药媒318,麸皮295,磷酸二氢钾025,微晶纤维素379,胰蛋白胨04,硫酸铵02,硫酸镁003,氯化钙003250mL三角瓶装量为25mL,160180rmi
2830℃培养6天
f3、试剂a磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液溶液A:02molLNa2HP04H20:取Na2HP04H20356g或Na2HP0412H207162g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL。溶液B:01molL柠檬酸液:取一水柠檬酸(C6H8O7H20)2101g,用蒸馏水溶解后定容至1000mL。溶液C:取A液493mL,加入507mLB液混合均匀即为pH48磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液。bDNS试剂取酒石酸钾钠182g,溶于500mL蒸馏水中,加热,于热溶液中依次加入35-二硝基水杨酸63g,NaOH2lg,苯酚5g,亚硫酸钠5g,搅拌至溶,冷却后用蒸馏水定容至1000mL,贮于棕色瓶中备用,室温下放置7天后使用。有效期一个半月。c羧甲基纤维素钠(CMCNa)溶液取2g羧甲基纤维素钠(粘度300600厘泊)溶于200mL蒸馏水中,水浴加热至溶,用一层纱布过滤。取滤液100mL,加入PH48磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液20mL,蒸馏水40mL混匀,贮冰箱备用。一周后应重新配制。d1标准葡萄糖液精确称取经105℃烘至恒重的无水葡萄糖(AR)1000g,以蒸馏水溶解,定容于100mL容量瓶中制成1浓度的标准葡萄糖液4、仪器和设备:新华滤纸1、、固定床反应器、水浴恒温振荡器、台式离心机、生化培养箱、恒温制冷加热器、精密移液器。恒温水浴锅40±2℃、紫外分光光度计UV1601、电子天平0001g漩涡混合器等。【实验步骤】(一)、标准曲线的绘制:分别吸取1标准葡萄糖液10,20,30,40,50,60mL于50mL容量瓶中,用蒸馏水制成每mL分别含有葡萄糖200,400,600,800,1000,1200μg的标准液。各取不同浓度标准液05mL于试管中,加PH48磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液15mL,DNS试剂3mL于沸水浴中沸腾7mi
(样品放入重新沸腾时算起),取出后立即加入蒸馏水10mL混匀,冷却后,在紫外分光光度计550
m比色,以所得的光密度OD值为横座标,以对应的标准葡萄糖液浓度的二分之一的值(即:100,200,300,400,500,600,此为每管中葡萄糖的μg数)为纵座标,绘制标准r