常用抗体标记荧光染料的特性及其应用
1、FITC:激发波长488
m,最大发射波长525
m。1)其标记的抗体适用于所有配备488
m氩离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL1通道检测;3)可用于荧光显微镜技术4)荧光强度易受PH值影响,PH值降低时其荧光强度减弱。
2、AlexaFluor488:激发波长488
m,最大发射波长519
m。1)其标记的抗体适用于所有配备488
m氩离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL1通道检测;3)具有超乎寻常的光稳定性,非常适用于荧光显微镜技术;4)在较宽的PH值范围内保持稳定(PH4~10)。
3、Cy3:激发波长488
m,最大发射波长570
m。1)其标记的抗体适用于所有配备488
m氩离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL2通道检测;3)适用于荧光显微镜技术;4)为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于PE。
4、Cy5:激发波长633635
m,最大发射波长670
m。1)其标记的抗体适用于所有配备633
m氩离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL4通道检测;3)适用于荧光显微镜技术;4)同样为小分子染料,非常适合需小分子染料的流式细胞术,荧光强度低于APC。5)与单核和粒细胞非特异性结合多,易出现假阳性结果。
5、PE:激发波长488
m,最大发射波长575
m。1)其标记的抗体适用于所有配备488
m氩离子激光器的流式细胞仪;2)在流式细胞仪的FL2通道检测;3)其荧光泯灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术,但适用于激光共聚焦显微镜技术。
6、PETR:激发波长488
m,最大发射波长615
m。1)在Beckma
Coulter流式细胞仪的FL3通道检测;2)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。
7、PEAlexaFluor610:激发波长488
m,最大发射波长628
m。1)在Beckma
Coulter流式细胞仪的FL3通道检测;2)荧光强度高;3)可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。
f8、PEAlexaFluor647:激发波长488
m,最大发射波长668
m。1)在Beckma
Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;2)不易湮灭;3可适用于小功率激光器的流式细胞仪,也可使用于大功率激光器的大流式细胞仪。
9、PECy5:激发波长488
m,最大发射波长670
m。1)在Beckma
Coulter流式细胞仪的FL4通道检测,BD细胞仪FL3通道检测;2可适用于大、小功率的流式细胞仪;3)淬灭性强,不适用于传统的荧光显微镜技术;4可与FITC、PE搭配,荧光干扰小、补偿小,但不宜与APC搭配。5)与单核细胞和粒细胞非特异性结r