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表达某种抗原的细胞作样品检测,应出现阴性。目的是避免实验的非特异性反应。④正常对照:对一种新的MoAb,在使用前进行对照试验,可保证仪器在最佳条件下获取样品。⑤质控品:试剂厂方提供与待测样品成分相近的稳定的质控物,并提供检测项目的靶值和质控范围,作为某一试验项目的全程质量检测物,评估试验结果的可靠性。如BDMultiCheckCo
trol是淋巴细胞及其亚群分析的全血质控品。(3)仪器的校准与性能检测使用标准荧光微球,运行FACSComp软件,校准通过,表明仪器状况良好。
二、流式细胞仪的功能和临床应用流式细胞仪最大的贡献在于促进了免疫学基础研究和临床诊断。目前流式细胞术已被广
泛用于细胞生物学、免疫学、肿瘤学、血液学、病理学、遗传学和临床检验等多学科领域的基础和临床研究。
1.流式细胞仪的功能
f(1)细胞参量分析包括细胞大小、形状、蛋白荧光、氧化还原状态,膜的结构、流动性、微粘度、膜电位,酶活性,钙离子含量,pH值,染色质结构,DNA合成,碱基比例等。(2)细胞表型分析从1982年正式以CDclustorofdiffere
tiatio
来表达(示)白细胞分化抗原。己确定的CD序号从CDl一CD247,这些细胞表面分化抗原,可以将人体组织细胞分为T细胞、B细胞、髓样细胞、血小板、NK细胞、粘附分子、内皮细胞,细胞因子受体/趋化性细胞因子受体、干细胞/祖细胞、碳水化合物/凝集素、非谱系组共13系。CD抗原在细胞表面的获得和丢失在一定程度上反映细胞分化程度和功能状态。研究CD的意义在于①理解CD抗原分子本身的一些特性及其与免疫功能的关系;②认识和探讨CD抗原所表达细胞的功能及其在疾病发生中的作用。(3)细胞分选这是FCM的一项重要功能,目前FCM对细胞亚群的分选纯度可以达到99,除了对特定的亚群加以分选外,还可以分出所需要的染色体加以分析甚至能结合PCR方法加以扩增,这多用于研究中。2.流式细胞仪检测在临床的应用流式细胞仪的功能决定了其在医学领域的重要地位,目前在临床上主要用于细胞表型分析、造血系肿瘤诊断和分型、移植前配型及与免疫有关疾病分析等。(1)CD抗原与白细胞分析①T细胞CD3(注意下面CD分子的格式应一致):成熟T淋巴细胞,是鉴定T细胞的重要标志,判断细胞免疫状况。CD4:T辅助诱导细胞亚群CD8:T抑制细胞毒亚群CD4CD8比值:是免疫状态标志的检测指标,正常CD4CD8比值为12∽29在肿瘤、免疫缺陷病、病毒感染、自身免疫病、器官移植后都有诊断、预后和治疗的指导价值,其比例r
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