人高半胱氨酸(homocystei
e)酶联免疫检测试剂盒使用说明书
使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人高半胱氨酸(homocystei
e),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用
途:用于人组织及相关液体样本中高半胱氨酸(homocystei
e)的测定。
工作原理
本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人高半胱氨酸(homocystei
e)的水平。向预先包被了人高半胱氨酸(homocystei
e)单克隆抗体的酶标孔中加入高半胱氨酸(homocystei
e),温育;洗涤后,加入HRP标记过的高半胱氨酸(homocystei
e)抗体。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人高半胱氨酸(homocystei
e)的浓度呈正相关。
试剂盒组成
123456标准品(24μmolL)标准品稀释液酶标包被板酶标试剂05ml3ml12孔×8条6ml20ml6ml789101112显色剂A液显色剂B液终止液说明书封板膜密封袋6ml6ml6ml1份2张1个
30倍浓缩洗涤液
样品稀释液
需要而未提供的试剂和器材
1.2.3.4.5.6.37℃恒温箱。标准规格酶标仪。精密移液器及一次性吸头蒸馏水,一次性试管吸水纸
注意事项
1.从28℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
f3.建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(
倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×
×5)。4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。6.不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。7.底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
洗板方法
手工洗板方法:甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少035ml注入孔内,浸泡12分钟。根据需要,重复此过程数次。自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
标本要求
1.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。2.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于20℃保存,但应避免反复冻融。
操作程序
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