培养基冷却至①在火焰旁右手拿
℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：，左手；
f②使锥形瓶的瓶口③左手将培养皿皿盖。④待平板冷却凝固后，将平板
；，右手，立刻盖上
。
【思考7】锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？
【思考8】平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
【思考9】若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？
【思考10】试管为什么要加塞棉塞？
二、纯化大肠杆菌微生物接种：最常用的是刺接种和斜面接种等。1．平板划线法是将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至。的操作，法和法。另外还有穿
②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到④将冷却的接种环伸入到⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。的目的。。
编号①②③④⑤
成分粉状硫（NH4）2SO4K2HPO4MgSO4FeSO4
含量10g04g40g925g05g
f⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环不要划破培养基。⑦灼烧接种环，冷却后从过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将⑧将平板【思考11】取菌种前灼烧接种环的目的是什么？培养。，盖上皿盖，
⑥⑦
CaCl2H2O
05g100ml
划线。重复上述相连。
2．稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。系列稀释操作：①取分别盛有mL水的试管6支，编号101、102、103、104、105、106。
②用灼烧冷却的移液管吸取③从101倍液中吸取依此类推。
mL菌液注入编号为101试管中，并吹吸3次使之混匀。mL菌液注入到编号为102试管内吹吸均匀，获得102倍液。
【思考12】系列稀释操作的注意事项是什么？
【思考13】若某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因？
【思考14】频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么？
二、检测与反馈（课堂完成）1下列关于微生物营养的说法，正确的是A．同一种物质不可能既作碳源又作氮源C．除水以外的无机物仅提供无机盐B．凡是碳源都能提供能量D．无机氮源也能提供能量
2细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌A．接种针、手、培养基C．培养基、手、接种针B．高压锅、手、接种针D．接种针、手、高压锅
f3以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是A．操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭r