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,镜检。染色的结果,革兰氏正反应菌体都呈紫色,负反应菌体都呈红色。17芽孢染色法
(1)取等量破伤风杆菌厌氧培养菌液和5孔雀绿水溶液,放入小试管中充分混合,沸水浴20mi
取上述混合液涂片、干燥、固定(2)用1沙黄液复染10mi
,水冲洗(3)干后镜检。(4)镜下,破伤风杆菌的菌体染成红色,芽胞染成绿色。传统的方法是滴加石炭酸复红染液于涂片上并弱火加热,
使染液冒蒸汽约5mi
,此法染液用量大,且容易污染衣物和实验台。现改为菌液和染液混合水浴加热初染,然后制备涂片、固定、复染,即节约时间,染液消耗又少,且菌体、芽胞对比鲜明。18荚膜染色法
荚膜染色法(1)取菌涂片、干燥、固定(2)染色用石炭酸复红染液染1mi
,水冲洗95酒精脱色5s水冲洗20鞣酸溶液媒染10mi
水冲洗08孔雀绿溶液染色1mi
,水冲洗(3)吸干后镜检。(4)镜下,菌体
染成红色(成双排列),荚膜染成绿色,存在于菌体的周围。传统的荚膜染色是用结晶紫染液染色,菌体染成紫色,荚膜染成淡紫色或无色,菌体和荚膜之间反差小,不易分辨。改良后,增加了脱色、媒染、复染的步骤,使菌体和荚膜之间反差增大,易于观察。
f19摇床使用注意事项1、仪器放置要平整,环境应清洁整齐,干燥通风。2、为避免仪器产生较大的振动,装瓶时应分布均匀,避免偏载现象出现,各瓶的培养液应大致相等。如非必要情况下试瓶不应装载过满,以免影响气流循环从而降低工作室的温场的均匀度。3、使用结束后清理机器,不能留有水滴,污物残留。20镜检操作注意事项1、观察时要注意物镜与样品的距离,不要压到样品。2、目镜物镜需用专用的擦镜纸擦拭。3、使用油镜后,应尽快用擦镜纸蘸95酒精擦干净,以防时间长了污染镜头不好清洗。21菌种筛选依据(1)菌落特征:圆圆的透明的雨滴状。(2)镜捡:单个球菌或多个链球状,无杂菌。(3)分析各菌株OD值,残糖,粘度,透明质酸产量,乳酸含量等参数,选取残糖乳酸低,OD值高、粘度、透明质酸产量高的菌株。(4)选出的菌种上实验罐验证实际产量。22菌种室如何保证无菌环境(1)菌种室四周地面应保持干净,防止起尘。室内要做到干干净净物品摆放整齐有序。(2)每天下班后用025双氧水或其它消毒液拖地一次,两药(或几种药)隔天轮换使用。(3)每周进行大扫除一次,墙面、平台、药品架先用清水擦拭干净,再用药水擦拭。并开紫外灯照射30分钟。药水种类每周更换一次,平时要常用药水擦拭桌面。(4)菌种室应保持干燥,定期开启去湿r
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