产生气泡；（3）其他注意事项同迁移试验。
其他
Tra
swell做肿瘤侵袭实验的具体步骤1基质胶准备：将冻存于－80度冰箱的BDmatrigel4度过夜（24h），变成液态；（2）取300ul无血清培养基，加入60ul（或50ug每室）Matrigel，混匀，（4℃操作，最好在冰浴上），加入上室各100ul（3个室）；放入37℃培养箱中，孵育45h（5h）；此间经常观察，当出现“白色层”时，说明已经变为固态。注释：无血清培养基和基质胶按1：5稀释，每孔加50ul，在37℃培养箱中12h。（3）消化细胞，无血清培养基洗3次，计数，配成细胞悬液；（4）用无血清培养基洗Matrigel洗1次；每孔加入100ul细胞悬液；（5）下腔室中加入500ul含有20％FBS条件培养基；（6）37℃培养箱中，孵育2024h；（7）取出tra
swell用PBS洗2遍，5戊二醛固定，4℃；（8）加入结晶紫（01）染色或Giemsa染色（5－10mi
），室温05h，PBS洗2遍，用棉球擦去上表面细胞，显微镜下观察。
迁移实验
ftra
swell在24孔板中浸泡1小时；消化细胞，无血清培养基洗2次，计数，配成细胞悬液，每孔加入100ul细胞悬液；加药刺激；下腔室中加入条件培养基或其他刺激因子；37℃培养箱中，孵育2024h；取出tra
swell用PBS洗2遍，5戊二醛固定，4℃；PBS洗2遍，加入结晶紫（01）染色，室温05h，PBS洗2遍，用棉球擦去上表面细胞，显微镜下观察计数10照相，记录。侵袭实验取300ul无血清培养基，加入30ul（或50ug每室）Matrigel，混匀，（4℃操作，最好在冰浴上），加入上室各100ul（3个室）；放入37℃培养箱中，孵育45h（5h）；消化细胞，无血清培养基洗3次，计数，配成细胞悬液；用无血清培养基洗Matrigel洗1次；每孔加入100ul细胞悬液；下腔室中加入600ul无血清条件培养基；37℃培养箱中，孵育2024h；取出tra
swell用PBS洗2遍，5戊二醛固定，4℃；PBS洗2遍，加入结晶紫（01）染色，室温05h，PBS洗2遍，用棉球擦去上表面细胞，显微镜下观察
tra
swell小室是否可以重复利用，该怎样消毒
用棉签轻轻擦去胶和反面细胞，清水冲洗，超声清洗，低挡，30mi
，清水3×5mi
，蒸
馏水3×5mi
，室温凉干，用前紫外线小室正面3h，反面6h，微波，低火10mi
×2，
效果很好。
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