中华人民共和国行业标准
叶绿素的测定
（分光光度法）分光光度法）
ＳＬ88ＳＬ1994
Determi
atio
ofchlorophyII（Spectrophotometricmethod））
水利部1995／05／01批准1995／05／01实施／／／／
1总则
11主题内容本标准规定了用分光光度法测定水体中的叶绿素。12适用范围本标准适用于河流、湖泊、水库或池塘等水体中叶绿素的测定。13干扰及消除131脱镁叶绿素ａ能够干扰叶绿素ａ的测定，当含有脱镁叶绿素时叶绿素ａ的测定值偏高。因此，在测定叶绿素ａ的时候，还要测定脱镁叶绿素ａ132脱镁叶绿素ａ对叶绿素ａ的干扰，可通过测定叶绿素ａ酸化前后产生的吸收峰之比，对表观叶绿素ａ的浓度作脱镁叶绿素ａ的校正。
2原理
将一定量的试样用微孔滤膜过滤，收集植物性浮游生物，用90的丙酮溶液提取。将提取液离心分离后，测定750、663、645、630ｎｍ的吸光度，计算叶绿素的浓度。
f3仪器
31分光光度计。32比色池：10ｍｍ和50ｍｍ。33医用离心机。34离心管：10～15ｍＬ带塞刻度管。35研钵：直径约80ｍｍ。36过滤装置：过滤器，微孔滤膜（孔径045μｍ，直径60ｍｍ），真空泵（吸气泵或蠕动泵）。37常用实验设备。
4试剂
41碳酸镁悬浮液：1（ｍ／Ｖ）。称取10ｇ细粉末碳酸镁（ＭｇＣＯ3）悬浮于100ｍＬ蒸馏水中。每次使用时，要充分摇匀。42丙酮溶液：90（ｖ／Ｖ）。在900ｍＬ丙酮中加100ｍＬ蒸馏水。43盐酸溶液：1ｍｏｌ／Ｌ。量取83ｍＬ盐酸（ρ＝119ｇ／ｍＬ）溶于水中，冷却并稀释至1000ｍＬ。
5样品的采集与保存
51样品应按浮游植物定量采样方法，采集在玻璃或聚乙烯瓶子里。河流、湖泊、水库取500ｍＬ，池塘取300ｍＬ。52采样后，样品应放在荫凉处，避免日光直射，最好立即对水样进行分析处理。如需放置水样，则应避光冷藏保存（2～5℃），而且每升水样需加1ｍＬ1碳酸镁悬浮液，以防止酸化引起色素溶解。
6步骤
f61浓缩：在一定量的试样中添加02ｍＬ碳酸镁悬浮液，充分搅匀后，用直径60ｍｍ的微孔滤膜吸滤。过滤器内无水分后，还要继续抽吸几分钟。如果要延时提取，可把载有浓缩样品的滤膜放在干燥器里冷冻避光贮存。62提取：将载有浓缩样品的滤膜放入研钵中，加入3ｍＬ丙酮溶液（42）至滤纸浸湿的程度，把滤膜研碎，再少量地加90的丙酮溶液，把滤膜完全研碎，然后用90丙酮溶液将已磨碎的滤膜和丙酮溶液洗入带刻度的带塞离心管中，使离心管内提取液的总体积不超过6ｍＬ，盖上管塞，置于4℃的暗处浸泡24ｈ。63离心：将离心管r