死细胞中而呈色，而活细胞因细胞膜完整，染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypa
blue染料，如果细胞不易吸收trypa
blue，则用红色之Erythrosi
bluish。计算细胞活率：活细胞数（活细胞数死细胞数）×100。计数应在台盼兰染色后数分钟内完成，随时间延长，部分活细胞也开始摄取染料；因为台盼兰对蛋白质有很强的亲和力，
用不含血清的稀释液，可以使染色计数更为准确。
2、材料：04wvtrypa
blueGibcoBRL15250061；Erythosi
bluishstai
；取01gramErythrosi
bluishSigmaE9259及005grampreservativemethylparabe
SigmaH3647溶于100mlCaMgfreesali
e；血球计数盘及盖玻片Hemocytometera
dcoverslip；计数器cou
ter；低倍倒立显微镜；粒子计数器Coultercou
terCoulterElectro
ics。白细胞稀释液（4乙酸溶液）。3、步骤：（1）取50μl细胞悬浮液与50μltrypa
blueorErythrosi
bluish等体积混合均匀于15ml小离心管中。（2）取少许混合液约15μl自血球计数盘chamber上方凹槽加入，盖上盖玻片，于100倍倒立显微镜下观察，活细胞不染色，死细胞则为蓝色或红色Erythrosi
bluish。（3）计数四个大方格之细胞总数，再除4，乘以稀释倍数至少乘以2，因与trypa
blue等体积混合，最后乘以104，即为每ml中细胞悬浮液之细胞数。若细胞位于线上，只计上线与右线之细胞或计下线与左线之细胞。注：4大格细胞总数×稀释倍数×1044细胞数ml；每一大格的体积01cm×01cm×001cm104ml计数板计数时，最适浓度为5～10×105细胞ml，此范围外计数误差偏大。高浓度细胞悬液，可取出部分作稀释或连续稀释后计数。
5、范例：T75mo
olayerculture制成10ml细胞悬浮液，取01ml溶液与01mltrypa
blue混合均匀于试管中，取少许混合液加入血球计数盘，计数四大方格内之细胞数目。
活细胞数方格：55，62，49，59；死细胞数方格：5，3，4，6；细胞总数243平均细胞数方格6075；稀释倍数2；细胞数ml：6075×104×2（稀释倍数）122×106；细胞数flask（10ml）：122×106×10ml122×106存活率：225243926
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