pH值(35404550556070)并以大肠杆菌作指示菌进行抑菌的试验从未接种的MRS液体培养基调节至上述相应的PH值作对照
倒平板:将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化,倒在培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝固。此外,将融化的LB培养基冷却到50℃左右混入试验菌,将混有菌的培养基5ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。
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摆放牛津杯:以无菌操作在培养基表面直接垂直放上牛津杯(内径6mm、外径8mm、高10mm的圆形小管,管的两端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),轻轻加压,使其与培养基接触无空隙。
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PH处理分别用1mol/LHCI和2mol/LNaOH将菌株发酵上清液调至不同
的pH值(35404550556070)
5加入待捡药业:在杯中加入待检样品(发酵液),牛津杯一般可以装240微升勿使其外溢。67培养:加满后置37℃培养1618小时。结果报告:观察结果,抑菌圈用尺直接量就可以。
一蛋白酶处理对发酵上清液抑菌物质的影响分别用胃蛋白酶、胰蛋白酶,分别在它们最适pH(20,76),用浓度为100gmL的酶液在37℃处理1h,之后100℃水浴1mi
灭活,处理后将pH调到起点值再测定抑菌能力。
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倒平板:将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化,倒在培养皿内,每皿15ml(下层),待其凝固。此外,将融化的LB培养基冷却到50℃左右混入试验菌,将混有菌的培养基5ml加到已凝固的培养基上待凝固(上层)。
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摆放牛津杯:以无菌操作在培养基表面直接垂直放上牛津杯(内径6mm、外径8mm、高10mm的圆形小管,管的两端要光滑,也可用玻璃管、瓷管),轻轻加压,使其与培养基接触无空隙。
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蛋白酶处理分别用胃蛋白酶、胰蛋白酶,分别在它们最适pH(20,76),
用浓度为100gmL的酶液在37℃处理1h,之后100℃水浴1mi
灭活。
4加入待捡药业:在杯中加入待检样品(发酵液),牛津杯一般可以装240微升勿使其外溢。56培养:加满后置37℃培养1618小时。结果报告:观察结果,抑菌圈用尺直接量就可以。
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