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5次,洗涤完后扣干,每次保持3060秒浸泡。所有废液要置于含消毒剂的废液瓶中。洗板机洗,一共洗涤5次,每次浸泡30秒,洗涤液要注满每孔(约300μl孔,最后一次吸出,在吸水纸上拍打,除去残留液体。210加酶:分别在每孔中加酶标记抗原100μl。211温育:置37℃温育30分钟。212洗涤:用洗涤液充分洗涤5次,洗涤完后扣干,每次保持30~60秒浸泡。213显色:每孔加底物A、B各50μl,轻拍混匀,37℃静置20分钟。214终止:每孔加入终止液50μl,混匀。215测定;用酶标仪单波长450
m或双波长450/630
m测定OD值。216计算结果:每块板分开计算。
3实验的有效性:
起草人:唐立红、吴润强审核人:陈洁晶
批准日期:2010年9月9日生效日期:2010年9月9日
中国人民解放军第一八一医院
f中国人民解放军第一八一医院HIV初筛实验室质量手册
HIV初筛实验室标准操作程序
版号:第四版
页号总页数:颁布日期:
949
2010年9月
31PCxNCx值060以上且NCx小于010方可认为本次实验有效。如实验结果不符上述要求,需重复检测。绘制质控图,外部对照还应满足外部对照未失控,否则要重复操作。32临界值计算CutoffValue010NCx(若NCx均小于005,以005计)33结果判定标本OD值≤CutoffValue为阴性标本OD值CutoffValue为阳性阳性者取双孔复试,复试阳性者送HIV确认室进行免疫印迹法确认34填写“HIV抗体检测原始实验记录”,“仪器使用登记表”,“质控登记表”
4报告检测结果为阴性报告“HIV抗体阴性”,如检测为可疑阳性的标本应送区疾病预防控制中心或全军HIV确认室确认,并出具“HIV抗体待复查”的报告。
5完成实验51未用完的试剂盒放入封口袋中封好,放回冰箱。52关闭酶标仪和洗板机。53处理各种废物,清洁和消毒工作区。54保存标本:阳性或可疑阳性的标本要离心吸取血清,并分装数管冻存,以备复检或送检。
6注意事项61检查水浴箱的温度37℃,移液器的准确性。62加标本和质控时要注意,冻融或长期存放的标本加样前应摇匀,有絮状沉淀时应离心取上清。63每次试验应包括空白,2孔阴性对照,2孔阳性对照。空白对照只加底物和终止液。所有使用过的吸头要放入盛有消毒剂的容器内。64未用完的板条应置于有干燥剂的密封袋中。65显色后注意避光。加样要求准确,加酶、A液、B液、终止液时尽量用移液器加。66读数(程序见HIVSOP006)终止显色后在30分钟内读数,酶标仪用检测波长450
m,参考波长为630
m。
7附件清单71新创HIV抗体双抗原夹r
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