是也不能低于1015molL。dNTP浓度过高易引起非特异性PCR产物，还会抑制Taq酶的活性；浓度过低则会影响扩增产量。尤其重要的是4种dNTP的体积浓度要相等，否则就会引起错配。25Mg2缓冲液
PCR反应的标准缓冲液通常含有10mmolLTrisHClpH83，50mmolLKCl和15mmolLMgCl2。PCR反应体系中Mg2的浓度非常的重要，当各种dNTP浓度为200molL时，Mg2浓度为1520mmolL时为宜。当Mg2浓度过高时，会使反应特异性降低，出现非特异扩增；当浓度过低时会使TaqDNA聚合酶的活性降低，使反应产物减少。同时，Mg2的有效浓度受到高浓度的螯合剂、高浓度的带负电荷离子基团的影响，比如EDTA、磷酸根等。它们可与Mg2结合从而降低Mg2的有效浓度。因此，每当首次使用靶序列、引物、dNTP含磷酸根的新组合时，都要将Mg2浓度调至最佳。通常的方法是设置一组反应实验，每一反
f应的TrisHCl10mmolL和KCl50mmolL浓度相同，MgCl2浓度不同0055mmolL，每次增加05mmolL，反应结束后，通过琼脂糖凝胶电泳或聚丙烯酰胺凝胶电泳来比较各反应扩增产物的量，从中选出最佳的Mg2浓度。
3、PCR相关技术的发展
31PCR芯片传统的PCR扩增仪的缺点是体积大，因此所需的样品量大，热容量也大，降低了反应
效率。随着微电子机械系统（microelectromecha
icalsystemMEMS）技术的发展，wildi
g于1994年首次成功的在硅芯片上完成了PCR扩增反应。PCR芯片的原理是把硅制薄片的反应器代替传统的塑料小管用于PCR反应，构成了一次性PCR芯片4。与传统PCR仪相比，PCR微芯片具有体积更小，反应速度加快、操作更加简便、价格低、样品使用量少、节省试验成本、集成化、结果可靠等优点。芯片表面的化学材料的特性对PCR的成功起到关键的作用。没有经过表面处理过的裸露的以及一些硅相关的材料对PCR扩增反应起抑制作用24。目前通常使用的方法是对芯片中的微反应池通道的内表面进行钝化处理4，比如对反应接触面进行硅烷化及多聚物处理，或者在芯片表面添加一层二氧化硅以消除芯片表面对PCR的影响12。
利用微电子机械系统（MEMS）技术不仅可以制作PCR芯片，实现DNA片段的迅速扩增，而且可将整个分子生物学的实验过程包括采样、稀释、抽提、进样、扩增、分离、检测等集成在微芯片上，实现分析系统从样品处理到检测的整体微型化、集成化与便携化，并最终实现微全分析系统MicroTotalA
alysisSystem，μTAS或称为芯片实验室LabO
Chip。
PCR芯片实质上就是在固相载体上固定与研究对象相关的许多已知基因的引物阵列，并且r