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2016年南方医科大学医学微生物学实验报告
日期2016年5月22号
题目
脓汁和粪便标本中病原菌的检测
成绩
实验者
年级专业指导老师
作者:马浩楠3140020007
参与者名字:马浩楠丁超王尧鑫桂文茁
2014级医学影像专业
罗军
一、实验目的
1、掌握培养基制备的原则和一般方法。2、掌握病原菌的分离与培养方法。3、掌握油镜的正确使用、细菌涂片标本的制备、革兰氏染色法,熟悉细菌基本形态。4、熟悉几种常用的细菌生化反应的名称、原理、方法、结果分析及用途。5、掌握血浆凝固酶试验的原理、方法及用途。6、熟悉药物敏感性试验方法的种类、原理及应用,掌握纸片扩散法。7、掌握玻片凝集试验的原理、方法、结果观察与判断。
二、实验器材
1、天平、称量纸、干粉培养基、锥形瓶、量筒、15支试管、试管架、试管筐、5ml刻度吸管、平皿、洗耳球、酒精灯2、脓汁标本1支,粪便标本1支;伊红美兰平板2个,营养琼脂平板2个,伊红美蓝平板2个,接种环,酒精灯3、斜面4支、细菌分离培养物(上次实验平板)
f4、斜面培养物4支,营养肉汤4支,生理盐水2支,镜油瓶、拭镜纸1套,吸水纸1本,载玻片4张,染色瓶,染色架5、斜面培养物4支,营养肉汤培养物(菌液)4支,半固体琼脂4支,营养琼脂平板4个,糖发酵管1套,抗菌素纸片1套,眼科镊子2把6、半固体培养物4支,药敏试验培养物4个,微量发酵管培养物1套。
三、方法与步骤
1、培养基的制备:
培养基
称量干粉培养基g
水量ml
营养琼脂
114
300
营养琼脂
27
70
营养肉汤
13
60
半固体琼脂
17
60
煮沸次)
313
分装ml
备注
3瓶,500ml瓶,平板
14支×3,中5
试管,斜面20支×2,小3试管,肉汤14支×3,小4试管,高层
(1)营养琼脂培养基的制备:称量114g琼脂,置于三角烧瓶中,加入300ml蒸馏水,分2瓶装,用于倒平板。
(2)营养琼脂培养基的制备(用于制作斜面):称量29g琼脂,置于三角烧瓶中,加入75ml蒸馏水,放在电炉上,先后煮沸3次,分15支中试管装,每支试管5ml。
(3)肉汤培养基的制备(用于制作液体培养基):称量11g琼脂,置于三角烧瓶中,加入50ml蒸馏水,放在电炉上,煮沸1次,分15支小试管装,每支试管5ml。
(4)半固体琼脂培养基的制备:称量17g琼脂,置于三角烧瓶中,加入60ml蒸馏水,放在电炉上,先后煮沸3次,分15支中试管装,每支试管4ml。
2、细菌的分离培养平板划线分离法
f甲→脓汁标本→营养琼脂平板黄色)乙→脓汁标本→营养琼脂平板黄色)丙一粪r
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