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标,绘制标准曲线此线应通过零点。根据作图或用回归方程计算出当吸光度为1时的酪氨酸的量g,即为吸光常数K值。254酶活力的测定a先将酪素溶液放人40C士2C恒温水浴中,预热5mi
b按下列程序操作步骤12345678910112542计算XAK410
25AK
式中X一一样品的醉活力,ugumLtA一一样品平行试验的平均吸光度K一吸光常数4一反应试剂的总体积mL10一一反应时间10mi
,以lmi

一一稀释倍数。所得结果表示至整数。试管A空白加酶液100ml(离心上清液)40℃±02℃水浴2mi
加三氯乙酸200ml摇匀40℃±02℃10mi
加酪素100ml摇匀取出静止10mi
过滤取100ml滤液加碳酸钠溶液50ml加福林试剂使用液100ml40℃±02℃显色20mi
于680
m波长测其吸光度试管B酶试样,做3个平行试样加酶液100ml(离心上清液)40℃±02℃水浴2mi
加酪素100ml摇匀40℃±02℃10mi
加三氯乙酸200ml摇匀取出静止10mi
过滤取100ml滤液加碳酸钠溶液50ml加福林试剂使用液100ml40℃±02℃显色20mi
于680
m波长测其吸光度
f26培养基优化(正交实验)正交试验设计是利用正交表来安排与分析多因素试验的一种设计方法。它是由试验因素的全部水平组合中,挑选部分有代表性的水平组合进行试验的,通过对这部分试验结果的分析了解全面试验的情况,找出最优的水平组合。正交试验设计的基本特点是:用部分试验来代替全面试验,通过对部分试验结果的分析,了解全面试验的情况。正因为正交试验是用部分试验来代替全面试验的,它不可能像全面试验那样对各因素效应、交互作用一一分析;当交互作用存在时,有可能出现交互作用的混杂。虽然正交试验设计有上述不足,但它能通过部分试验找到最优水平组合,因而很受实际工作者青睐。例如下表为一培养基优化的4因素3水平简表4因素3水平表因素蔗糖()NH4NO3()KH2PO4()MgSO47H2O()
A水平123101520
B
C
D
010203
0050103
0102505
27产蛋白酶菌生长曲线的测定271获取不同培养时间发酵液2711整点800时,准时接入已经活化好的对数期菌种,用1000ul的移液枪吸取5ml
的对数期菌液加入到发酵瓶A中(液体为酪素培养基),剩下的对数期菌种菌液置于4℃冰箱种中保藏于。并同时将A号发酵瓶放到摇床中,继续30℃震荡发酵。在直到2000时将放在冰箱中保藏的菌种液(活化的对数期菌种)取出5ml接种到B号发酵瓶中。并放在30℃的摇床中继续发酵。2712在8:00时,将放在冰箱中保藏的菌种液(活化的对数r
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