载体的自身环化，载体也有成环的倾向；5用这种方法产生的重组体往往含有不止一个外源片段或不止一个载体连接起来的串联重组体，增加筛选工作的困难。4、什么是同聚物加尾连接法？用何种方法加尾？具有哪些优缺点？答：所谓同聚物加尾法就是利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸，制成人工黏性末端，外源DNA和载体DNA分子要分别加上不同的寡聚核苷酸，如dAdG和dTdC然后在DNA连接酶的作用下涟接成为重组的DNA。这种方法的核心是利用末端转移酶的功能，将核苷酸转移到双链DNA分子的突出或隐蔽的3OH上。以Mg2作为辅助因子，该酶可以在突出的3OH端逐个添加单核苷酸，如果用Co2作辅助因子则可在隐蔽的或平末端的3OH端逐个添加单个核苷酸。
同聚物加尾法实际上是一种人工黏性末端连接法，具有很多优点：．1首先不易自身环化，这是因为同一种DNA的两端的尾巴是相同的，所以不存在自身环化。2因为载体和外源片段的末端是互补的黏性末端，所以连接效率较高。3用任何一种方法制备的DNA都可以用这种方法进行连接。同聚物加尾法也有一些不便之处：1方法繁琐；2外源片段难以回收。由于添加了许多同聚物的尾巴，可能会影响外源基因的表达。另外要注意的是，同聚物加尾法同平末端连接法一样，重组连接后往往会产生某种限制性内切核酸酶的切点。5、何谓接头连接法？答：将人工合成的或来源于现有质粒的一小段DNA分子在这一小段DNA分子上有某种限制性内切核酸酶的识别序列，加到载体或外源DNA的分子上，这样便在载体DNA和外源DNA上制造出新的酶切点。把这一小段含有酶切点的DNA分子称为连接器分子，这种方法称为接头连接法。
三、论述题
1、什么是基因组文库ge
omiclibrary构建基因组文库，涉及哪些基本过程它同遗传学上的基因库有什么不同答：基因组文库是用基因工程的方法，人工构建的含有某一生物基因组DNA的各种片段的
克隆群。一般以改造的噬菌体DNA或黏粒作为载体，包括下列过程：1高分子量染色体DNA
的制备；2体外重组连接；3包装蛋白的制备；4重组体的体外包装；5将重组DNA
导人寄主细胞；6筛选。基因组文库同遗传学上所讲的基因库是完全不同的概念。基因库
ge
epool是指在进行有性生殖的某一群体中，能进行生殖的个体所含总的遗传信息。在
基因组文库的构建中，由于使用的载体不同，分为噬菌体载体和黏粒载体构建的基因组文库、
YAC文库、BAC文库等。
作业四：
一、名词解释
1、DNA重组：是由于不同Dr