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NA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新
fDNA分子的过程。2、克隆:科学家把人工遗传操作动物繁殖的过程叫克隆,这门生物技术叫克隆技术,其本身的含义是无性繁殖,即由同一个祖先细胞分裂繁殖而形成的纯细胞系,该细胞系中每个细胞的基因彼此相同。3、DNA克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质同源或异源、原核或真核、天然或人工的DNA与载体DNA相结合成一具有自我复制能力的DNA分子复制子,继而通过转化或转染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子,即DNA克隆。4、目的基因:把需要研究的基因称为目的基因。(一般把需要分析的基因称靶基因,在基因克隆过程中有时两者均称为插入基因,有时三者含义相近。)5、基因载体:基因载体是把基因导入细胞的工具,他的作用是①运载目的基因进入宿主细胞,②使之能得到复制和进行表达。6、质粒:质粒(plasmid)是细菌拟核裸露DNA外的遗传物质,为双股闭合环形的DNA存在于细胞质中,质粒编码非细菌生命所必须的某些生物学性状,如性菌毛、细菌素、毒素和耐药性等。质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性,与细菌的遗传变异有关。二、简答题1、常用的工具酶有哪些?其主要用途是什么?答:限制性内切核酸酶DNA聚合酶和Kle
ow大片段DNA连接酶碱性磷酸酶末端脱氧核苷酸转移酶限制性内切核酸酶能够识别特异的DNA碱基序列,DNA碱基序列往往呈回文对称结构;DNA聚合酶a位于细胞核内,也许是复合物,有催化细胞增生的作用;Kle
ow大片段它也可以通过基因工程得到,分子量为76kDa。DNA连接酶负责双链DNA中相邻3OH与5磷酸基团之间的磷酸二酯键的形成。碱性磷酸酯酶的作用是从DNA或RNA的三磷酸核苷酸上除去5磷酸根残基。末端转移酶的作用是将脱氧核糖核苷酸通过磷酸二酯键加到DNA分子的3OH末端。2、重组DNA技术常包括哪些基本步骤?答:①获得目的基因;②与克隆载体连接,形成新的重组DNA分子;③用重组DNA分子转化受体细胞,并能在受体细胞中复制和遗传;④对转化子筛选和鉴定。在具体工作中选择哪条技术路线;⑤对获得外源基因的细胞或生物体通过培养,获得所需的遗传性状或表达出所需要的产物。主要取决于基因的来源、基因本身的性质和该项遗传工程的目的。3、常用的目的基因的获取方法有哪些?答:直接获取从基因文库中提取目的基因,使用PCR扩增技术获得目的基因人r
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