持物上,然后用特异性
的抗体进行检测。它与Souther
的不同在于探针的性质不同,在Wester
印迹中使用的探
针是抗体蛋白质。
作业三:
一、名词解释1、DNA变性:DNA分子由稳定的双螺旋结构松解为无规则线性结构的现象。变性时维持双螺旋稳定性的氢键断裂,碱基间的堆积力遭到破坏,但不涉及到其一级结构的改变。2、DNA复性:变性DNA在适当条件下二条互补链全部或部分恢复到天然双螺旋结构的现象它是变性的一种逆转过程。3、退火:指模板双链DNA经热变性,螺旋解开成单链后,通过缓慢冷却到55℃左右,使引物即具有互补碱基的RNA片段与该模板DNA单链重新配对,形成新的双链分子的过程。4、DNA芯片:是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接将大量的DNA探针以显微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后与标记的样品杂交,通过对杂交信号的检测分析,即可获得样品的遗传信息。由于常用计算机硅芯片作为固相支持物,所以称为DNA芯片。5、错义突变:碱基替换的结果引起氨基酸顺序的变化。6、基因诊断:又称DNA诊断或分子诊断,通过分子生物学和分子遗传学的技术,直接检测出分子结构水平和表达水平是否异常,从而对疾病做出判断。二、简答题1、什么是蓝白斑筛选法?答:这种方法是根据组织化学的原理来筛选重组体。主要是在载体的非必要区插入一个带有大肠杆菌半乳糖苷酶的基因片段,携带有lac基因片段的载体转入lac的宿主菌
f后,在含有5溴4氯3引哚D半乳糖苷Xgal平板上形成浅蓝色的噬菌斑。外源基因插人lac或lac基因部分被取代后,重组的噬菌体将丧失分解Xgal的能力,转入lac宿主菌后,在含有5溴4氯3引哚D半乳糖苷Xgal平板上形成白色的噬菌斑,非重组的噬菌体则为蓝色噬菌斑。2、什么是基因文库?用重组DNA技术将某种生物细胞的总DNA或染色体DNA的所有片断随机地连接到基因载体上然后转移到适当的宿主细胞中,通过细胞增殖而构成各个片段的无性繁殖系(克隆),在制备的克隆数目多到可以把某种生物的全部基因都包含在内的情况下,这一组克隆的总体就被称为某种生物的基因文库。3、黏性末端连接法是最常用的连接方法,具有许多优点,但是也有一些不足,请指出这些不足之处。答:黏性末端连接法不足之处有:1载体易自身环化;2若是用同一种限制性内切核酸酶产生的黏性末端连接又不易定向克隆;3难插入特定的基因;4再者就是大片段DNA的重组率较低,即使用碱性磷酸酶处理了载体,防止了r