细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）
主要用途
细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod2，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定细胞线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）内线粒体钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。
技术背景
钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（io
izedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（
euromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的ATP产量达到细胞需求，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体纯化。Rhod2，罗丹明123（rhodami
e123）的衍生产物，一种与钙离子结合产生荧光，同时其正电荷特性，特异性地聚集在线粒体里，由此用于测定线粒体内钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长550
m，散发波长590
m，来定量测定线粒体的钙浓度。
产品内容
清理液（Reage
tA）染色液（Reage
tB）介导液（Reage
tC）饱和液（Reage
tD）阴性液（Reage
tE）产品说明书
40毫升30微升600微升
2毫升2毫升
1份
保存方式
保存染色液（Reage
tB）和介导液（Reage
tC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月
用户自备
15毫升离心管：用于工作液配制的容器细胞培养箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于样品操作的容器
f荧光酶标仪：用于荧光分析（共聚焦）荧光显微镜：用于荧光染色观察
实验步骤
一、测定准备
1．设定好荧光酶标仪（22℃）：激发波长550
m，散发波长590
m2．测定开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（Reage
tB）室温下r