需用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁(3)意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。二、动物细胞工程一般包括动物细胞与组织培养、细胞核移植、体细胞克隆、细胞融合、单克隆抗体的制备等技术(一)动物细胞培养(1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细
胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。(2)动物细胞培养的流程:
取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。(3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴
壁。细胞数目不断增多,当贴壁细胞分裂生长到表面相互抑制时,细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制。(4)动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境:培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的
抗生素,以防培养过程中的污染。此外,应定期更换培养液,防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养:合成培养基成分:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度:适宜温度:哺乳动物多是365℃+05℃;pH:72~74。④气体环境:95空气+5CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。
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f(5)动物细胞培养技术的应用:制备病毒疫苗、制备单克隆抗体、检测有毒物质、培养医学研究的各种细胞。
6动物细胞培养与组织培养的主要区别动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶等是组织块中的细胞分散(二)动物体细胞核移植技术和克隆动物1、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植(比较容易)和体细胞核移植(比较
难)。2、选用去核卵母细胞的原因:卵母细胞比较大,容易操作;卵母细胞细胞质多,营养丰富。3、体细胞核移植的大致过程是:(右图)
注意:1○a细胞核移植○b胚胎移植2原理:细胞
核全能性
克隆羊性别:白面绵羊
3、体细胞核移植技术的应用:
①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育;②保
护濒危物种,增大存活数量;
③生产珍贵的医用蛋白;
④作为异种移植的
供体;⑤用于组织器官的移植等。
4、体细胞核移植技术存在的问题:
克隆动物存在着健康问题、表现出遗传和生理缺陷等。
(三)动物细胞融合
1、动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本相同,诱导动物细胞融合的方法
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