℃保存。21取出原先分装好的扩增液，在管内按照如下体系配制PCR反应液，并做好标记每人份检测使用1管CYP2C19扩增液119μl管和1管CYP2C19扩增液219μl管。22取出原先分装好的扩增液，在管内按照如下体系配制PCR反应液，并做好标记。每人份检测使用1管CYP2C19扩增液119μl管和1管CYP2C19扩增液219μl管扩增1：试剂基因组DNACYP2C19扩增液1反应液A总体积体积（μl）519125
f扩增2：试剂基因组DNACYP2C19扩增液2反应液A总体积体积（μl）519125
23将各02ml离心管放入PCR仪中，按下列条件扩增：50℃5mi
；94℃5mi
；94℃25sec，48℃40sec，72℃30sec，35cycles；72℃5mi
。24取出扩增产物，2～8℃保存。
3
杂交显色31取出BaiO杂交显色试剂盒。将反应液B低速离心，吸取10μl加入杂交缓冲液瓶中混匀，备用。32临用前，取出1支抗体，低速离心，加入1ml抗体稀释剂，振荡混匀，制成抗体使用液，备用，剩余试剂20℃保存。33配制杂交反应液：吸取180μl杂交缓冲液，加入10μlCYP2C19扩增产物1和10μlCYP2C19扩增产物2，混匀。34按照下表要求，准备各管试剂于2ml离心管中。试管盒位置AB试剂名称预杂交液杂交反应液体积（μl）1200200

fCDEFG35将准备好的离心管插入试管盒相应位置中。
洗液1洗液2抗体液洗液3显色液
8001600200400200
36按照下表要求，设置百傲eHyb全自动杂交仪杂交程序。反应时间mi
530652053302仪器内取样位置试管盒位置ABCDEDFGA试剂名称预杂交液杂交反应液洗液1洗液2抗体液洗液2洗液3显色液预杂交液
步骤123456789
反应温度℃424242282828284228
取样次数112212112
37取出CYP2C19基因芯片，做好标记，将基因芯片插入杂交仪插片口中，旋紧密封旋钮。注意：芯片带有“BaiO”字样标签的一端朝外，有标签的一面朝上插入杂交仪中。38将试管盒放入杂交仪中，运行杂交程序。注意：试管盒中2ml离心管对应的位置要与其相对应的芯片放入杂交仪的位置相同。如上图离心管在试管盒中是放入第3列（从左往右数）的，那么该芯片也要放入杂交仪中对应的第3列（从左往右数）。4扫描41杂交反应结束后，取出芯片，用蒸馏水冲洗芯片表面，自然晾干。42启动BE20生物芯片识读仪43运行ArrayDoctor软件扫描器启动1分钟后，双击计算机桌面上的ArrayDoctor图示，运行ArrayDoctor软件。显示屏
f出现ArrayDoctor软件主页面。44放置芯片向下拨动检测窗开启按钮，打开检测窗盖，将芯片欲扫描面（带“BaiO”标签面r