，且需去除原培养液，在去除培养液的过程中，可能会把结晶去掉，导致结果不稳定。
22三联溶解液：SDS10g，异丁醇5ml，10MHCl01ml用双蒸水溶解配成100ml溶液（文献方法：周建军等，评价抗癌物质活性的改良MTT方法，中国医药工业杂志，1993，24（10）：455457），该溶解液不需去除原培养基，但溶解较慢。（个人觉得其溶解的能力不如DMSO强）
f该溶解液因含有SDS，在低温保存的时候易产生结晶，因此在用之前必须提前几小时拿至室温，将SDS结晶全部溶解后再使用。五、MTT法实验步骤1胰酶消化对数期细胞，终止后离心收集，制成细胞悬液，细胞计数调整其浓度至510×104ml。细胞详细计数方法请参照易生物实验技术中的相关文章。对于初学者而言，要使细胞达到510×104ml往往不知从何处着手，我在这里向大家提供一个简单的方法以初步确定细胞数量。以一般细胞培养常用的25cm2为例，1细胞密度在长到约8090（下图所示为8090密度时细胞的大致状态），消化离心收集后，将上清去掉，加入3ml培养基使其混匀。
2另取一支新的15ml无菌离心管（为下一步接种96孔板用），装入约9ml培养基3从第一步准备的3ml细胞悬液中取1ml加入上管，混匀后细胞计数，此时一般为或小于510×104ml，该浓度相当于细胞计数板4个大格内每大格平均510个细胞（见下图）；如果不够该浓度，再根据计数的结果滴加细胞悬液，每滴按50ul计算。
f细胞数量因实验目的不同应做相应调整，如一般细胞增殖实验每孔2000个就可以（相当于细胞悬液密度为2×104ml），细胞毒性实验每孔500010000个（相当于细胞悬液密度为5×104ml）。此外，还应根据细胞本身特性，如生长快慢，来决定细胞数量。比如：生长较快的细胞密度可略小。
2．将细胞悬液制备好后，轻轻混匀，每孔加入100ul这样待测细胞的密度为500010000孔（边缘孔用无菌PBS填充）。
l注意：因细胞在混匀后仍要继续沉降，因此接种的过程中要反复多次混匀，如每加6个孔就混匀一次，以确保接种的细胞密度在各孔之间完全相同，这对于MTT的结果至关重要。
3将接种好的细胞培养板放入培养箱中培养，至细胞单层铺满孔底（96孔平底板）加入浓度梯度的药物原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，但我们常在前一天下午铺板，次日上午加药一般57个梯度每孔100ul设35个复孔建议设6个，否则难以反应真实情况。下图可做为96孔板的的参考步局。
l对于加药，有人直接将药物按不同体积加入到96孔板中，以形成浓度梯度。但本人认为应尽r