是否插入了目的基因②目的基因是否转录出了mRNA①一种基因探针只能检测水体中的一种病毒;检测病毒可对照核酸序列②放射性同位素标记探针③基因探针是一小段cDNA,可以与相应基因转录出的mRNA结合(即使被切割)采用DNA分子杂交技术方法,用基因探针检测2抗原-抗体杂交:目的基因是否翻译成蛋白质如Ecoli合成人胰岛素原3个体水平的鉴定:如转基因抗虫植物(让害虫吞食该转基因棉植株的叶片,观察害虫存活情况,以确定其是否具有抗虫形状)根本原因:联系基因层面,cf基因序列碱基对脱氧核苷酸序列
(三)基因工程的应用
1动植物基因、细胞工程:优点①所需时间短②克服远缘杂交不亲和的缺陷(对应传统缺点)2基因工程药物:首次是生长素释放抑制激素,然后胰岛素(Ecoli产酶原)、干扰素等干扰素:我国第一个基因重组新药。一组具有多种功能的活性蛋白质(主要是糖蛋白),是一种由单核细胞和淋巴细胞产生的细胞因子。具有抗病毒、抗细胞分裂、免疫调节等多种生物学功能,是治疗病毒性肝炎和肿瘤的药物。干扰素是一种广谱抗病毒剂,并不直接杀伤或抑制病毒,而主要是通过细胞表面受体作用使细胞产生抗病毒蛋白,从而抑制乙肝病毒的复制;同时还可增强自然杀伤细胞(NK细胞)、巨噬细胞和T淋巴细胞的活力,从而起到免疫调节作用,并增强抗病毒能力。3基因治疗:将正常功能的外源基因导入缺陷细胞内(初级实验阶段、未临床实践)Cf有基因缺陷的染色体DNA分子上:具体与哪条DNA分子结合随机治疗隐性遗传病(正常基因相对缺陷基因呈显性)4安全性问题:在导入目的基因的同时可能会导入其他基因如抗生素抗性基因,可能会使人体内细菌抗药性增强,以致某些药物的药效减弱
(四)蛋白质工程的概念
蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。(基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质)
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专题2
(一)克隆
细胞工程
1克隆clo
e:无性繁殖系(只由一个模板分子、母细胞或母体直接形成新一代…)2克隆技术clo
i
g:从众多基因或细胞群体中通过无性繁殖和选择获得目的基因或特定类型细胞的操作技术3内容:(1)分子水平:基因克隆即目的基因的复制(受体细胞的无性繁殖)、分离(特定基因探针选择、钓取目的基因)过程
f(2)细胞水平:杂交瘤制备单克隆抗体(r