生物选修3知识点
（区别不同工程和不同操作水平）
专题1基因工程
概念：按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
基本原理：让目的基因在受体细胞内稳定且高效的表达理论基础：DNA是生物遗传物质的发现，DNA双螺旋结构，遗传信息传递方式核心：构建重组DNA分子
（一）基本工具（技术基础）
Cf工具工具酶
1限制性核酸内切酶
（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的
（不切割自身DNA的原因：原核生物中无该限制酶的识别序列或其已被修饰）
（2）功能：识别和切割DNA分子内一小段特殊的脱氧核苷酸序列（偶数碱基对回文序列）
特异性表现：识别特定片段、切割该片段中的特定位点、形成一种末
端
CfG↓GATCC↓GATC
（3）结果：DNA片段末端形成末端碱基互补的黏性末端或平末端
①用
切割（质粒）
②根据目的基因的位置或剪辑序列来确定限制酶的种类
③切割后的片段要画全
2DNA连接酶
（1）功能：连接具有末端碱基互补的2个DNA片段，形成重组DNA分子
CfDNA聚合酶：只能将单个脱氧核苷酸逐个添加到已有的脱氧核苷酸链之后，
需模板DNA，连接磷酸二酯键
3载体
（1）条件：①能在受体细胞中稳定保存并大量复制，基本不影响受体细胞正常生命活动
②一至多个限制酶酶切位点（必须在所需标记基因外），供外源DNA片段插入
③标记基因，便于筛选含有重组DNA分子的受体细胞
往往需要根据需求改造天然载体
（2）功能：①作为运载工具将目的基因转移到受体细胞内
载体选质粒的原因：具有环状结构，能够携带目的基因
②利用它在受体细胞内对目的基因进行大量复制和转录表达
（3）质粒（最常用的载体）
一种能够自主复制，在细菌或酵母菌中独立于染色体之外存在的双链环状DNA
分子
（4）其它载体：噬菌体、动植物病毒
二基因工程的基本操作程序
第一步：获取目的基因1目的基因：人们所需要的编码蛋白质的结构基因2方法1序列已知
①化学合成法较长DNA单链合成过程中容易出现碱基缺失
f如反转录法（eg获取mRNA逆转录成cDNA再用DNA聚合酶生成双链）
②聚合酶链式反应PCR扩增PolymeraseChai
Reactio
（1）原料：水、缓冲液、4种游离脱氧核苷酸、TaqDNA聚合酶、模板DNA……基因、对…基因特异的2段DNA引物（防止相互或自身折叠）
（2）过程：第一步：加热至90～95℃，DNA在高温下变性解链第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链r