取1∶10稀释液10mL，注入灭菌试管中，另用1mL灭菌吸管吸50次，使霉菌孢子充分散开。63取1mL1∶10稀释注入含有9mL灭菌水的试管中，另换一支1mL灭菌吸管吹吸此液为1：100稀释液。64按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1mL，灭菌吸管，样品污染情况的估计，选择三个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1液于灭菌平皿中，每个稀释度做两个平皿，然后将晾至45℃左右的培养基注入平皿转动平皿使之与样液混匀，待琼脂凝固后，倒置于25～28℃温箱中，3d后开始观察养观察5d。65计算方法：
f通常选择菌落数在10～150之间的平皿进行计数，同稀释度的两个平皿菌落平均稀释倍数，即为每克（或毫升）检样中所含霉菌和酵母数。稀释度选择及菌落报告方考GBT47892。66报告：每克（或毫升）食品所含霉菌和酵母数以cfugmL。
f食品卫生微生物学检验菌落总数测定
发布单位太原市质量技术监督局报送时间2007年12月19日浏览次数342
附件1GBT478922003
食品卫生微生物学检验菌落总数测定
1范围本标准规定了食品中菌落总数的测定方法。本标准适用于各类食品中菌落总数的测定。
2术语菌落总数是指食品检样经过处理，在一定条件下培养后如培基成分、培养温度和
pH、需氧性质等，所得1mLg检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。
菌落总数主要作为判定食品被污染程度的标志，也可以应用这一方法观察细菌在繁殖的动态，以便对被检样品进行卫生学评价时提供依据。3引用标准
GBT478928食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂4设备和材料41冰箱：0～4℃。42恒温培养箱：36±1℃。43恒温水浴锅：46±1℃。44均质器或灭菌乳钵。45架盘药物天平：0g～500g精确至05g。46菌落计数器。
f47放大镜4X。48灭菌吸管：1mL（具001mL刻度）、10mL（具01mL刻度）。49灭菌锥形瓶：500mL。410灭菌玻璃珠。5mm。411灭菌培养皿：直径90mm。412灭菌试管。16X16mm。413广口瓶或三角瓶：容量为500mL。414电炉。415试管架。416酒精灯。。417灭菌镊子、灭菌刀或剪子等。5培养基和试剂51营养琼脂培养基：按GBT478928中47规定。52磷酸盐缓冲稀释液：按GBT478928中322规定。53085灭菌生理盐水。5475乙醇。6检验程序
菌落总数的检验程序如下。检样
→
选择2～3个适宜的稀释度各取1mL分别加入灭菌培养皿内做成几个适当倍数的稀释液
f每皿内加入适量营养琼脂
菌落计数r