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36℃±1℃48h±2h
7操作步骤71检样稀释及培养711以无菌操作取样25mL或25g放入225mL灭菌生理盐水中,经充分振摇作成1:均匀稀释液。
固体检样在加入稀释液后最好置均质器中以8000rmi
~10000rmi
的速度处理1mi
做成110的均匀稀释液。712用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,沿管壁徐徐注入含有9mL灭菌生理盐水其他稀释液的试管内注意吸管尖端不要触及管内稀释液,振摇试管,混合均匀,做成100的稀释液。
f713另取1mL灭菌吸管,按上条操作顺序,做10倍递增稀释液,如此每递增稀释一即换用1支1mL火菌吸管。714根据食品卫生标准要求或对标本污染情况的估计,选择2~3个适宜稀释度,分做10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个度做两个平皿。715稀释液移入平皿后,应及时将凉至46℃营养琼脂培养基可放置于46±1℃水浴温注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀的灭菌平皿内作空白对照716待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。72菌落计数方法
做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。73菌落计数的报告731平板菌落数的选择
选取菌落数在30~300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平应采用两个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时落之间无明显界线,若仅有一条链,可视为一个菌落;如果有不同来源的几条链,则每条链作为一个菌落计。732稀释度的选择7321应选择平均菌落数在30~300之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之见表1中1。7322若有两个稀释度,其生长的菌落数均在30~300之间,则视两者之比如何来决若其比值小于或等于2,应报告其平均数;若大于2则报告其中较小的数字见表中例3。7323若所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以
f释倍数报告之见表1中例4。7324若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以倍数报告之见表1中例5。7325若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数报告之见表1中6。7326若所有稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,r
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