蓝琼脂平板上,置36±1℃温箱内,培养18~2
然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。
74证实试验
在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1~2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵
置36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无
杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。
75报告
根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mLg大肠菌群的MPN值
表1。
f0
0
0
30
5
90
0
0
1
30
0
0
2
60
0
0
3
90
0
1
0
30
5
130
0
1
1
60
0
1
2
90
0
1
3
120
0
2
0
60
0
2
1
90
0
2
2
120
0
2
3
160
0
3
0
90
0
3
1
130
0
3
2
160
0
3
3
190
1
0
0
40
5
200
1
0
1
70
10
210
1
0
2
110
1
0
3
150
1
1
0
70
10
230
1
1
1
110
30
360
1
1
2
150
1
1
3
190
2
0
0
90
10
360
2
0
1
140
30
370
2
0
2
200
2
0
3
260
3
0
0
230
40
1200
3
0
1
390
70
1300
3
0
2
640
150
3800
3
0
3
950
注1本表采用3个稀释度1mLg、01mLg、001mLg,每稀释度三管
f注2:表内所列数量如改用10mLg、1mLg和01mLg时,表内数字应相应降低10倍;如改用01mLg、001mLg、0001mLg时,则表内数字应相应增加10倍。其余可类推。
1大肠菌群能数(MPN)
表
附件3
附件3
GBT4789152003
食品卫生微生物学检验
霉菌和酵母计数
1范围本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。本标准适用于食品中大肠菌群的测定。
2引用标准GB478928食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
3设备和材料31冰箱:0~4℃。32恒温培养箱:25~28℃。33恒温振荡器。34显微镜:10X~100X。35架盘药物天平:0~500g,精确至05g。36灭菌具玻塞锥形瓶:300mL。37灭菌广口瓶:500mL。。38灭菌吸管:1mL(具001mL刻度)、10mL(具01mL刻度)。39灭菌平皿。
f310灭菌试管:16mmX160mm。311载玻片、盖玻片。312灭菌牛皮纸袋、塑料袋。313灭菌金属勺、刀。4培养基和试剂41马铃薯葡萄糖琼脂培养基,附加抗菌素按GBT478928中478规定。42孟加拉红培养基:按GBT478928中425沥规定。43灭菌蒸馏水。5检验程序
检样粮食块状食品粉状食品液状食品糊状食品
25g225ml无菌水25ml225ml无菌水
做成几个适当倍数的稀释液
选择三个适宜稀释度,各取1mL加入灭菌平皿内每皿加入适量培养基(可先用马铃薯葡萄糖琼脂附加抗菌素、高盐察氏培养基或孟
f培养基)
菌落计数
25℃~28℃5d
报告
6操作步骤61以无菌操作将检样25mL或g放于含有225mL灭菌生理盐水的具塞锥形瓶中30mi
,即为1∶10稀释液。62用1mL灭菌吸管吸r