了食品中大肠菌群的测定方法。
f本标准适用于食品中大肠菌群的测定。2术语
大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量，推断食品否污染肠道致病菌的可能。
食品中大肠菌群数系以100mLg检样内大肠菌群最可能数MPN表示。3引用标准
GBT478928食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂4设备和材料41温箱：36±1℃。42冰箱：0～4℃。43恒温水浴：445±05℃。44天平。45显微镜。46均质器或乳钵。47平皿：直径为90mm。48试管。49吸管。410广口瓶或三角烧瓶：容量为500mL。411玻璃珠：直径约5mm。412载玻片。413酒精灯。414试管架。
f5培养基和试剂51乳糖胆盐发酵管：按GBT478928中49规定。52伊红美蓝琼脂平板：按GBT478928中425沥规定。53乳糖发酵管：按GBT478928中410规定。54EC肉汤：按GBT478928中411规定。55磷酸盐缓冲稀释液：按GBT478928中322规定。56生理盐水。57革兰氏染色液：按GB478928中22规定。6检验程序
大肠菌群检验程序如下：（图略）
稀释检样乳糖胆盐发酵管36℃±1℃48h±2h
产气大肠菌群阴性
f伊红美蓝琼脂平板36℃±1℃48h±2h
不产气报告革兰氏染色
乳糖发酵管36℃±1℃48h±2h
革兰氏阳性革兰氏阴性无芽胞杆菌产气不产气大肠菌群阴性大肠菌群阳性大肠菌群阴性报告报告报告
f7操作步骤71检样稀释711以无菌操作将检样25mL或g放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭璃瓶内瓶内予置适当数量的玻璃珠或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1∶10的均释液。固体检样最好用均质器，以8000～10000rmi
的速度处理1mi
，做成1∶10匀稀释液。712用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL，注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀的试管内，振摇试管混匀，做成1∶100的稀释液。713另取1mL灭菌吸管，按上条操作依次做10倍递增稀释液，每递增稀释一次，换支1mL灭菌吸管。
f714根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释
种3管。
阳性管数
MPN
95可信限
72乳糖
1mLgX301mLgX3001mLgX3100mLg
下限
上限
试验
将待检
接种于乳糖
发酵管内，
量在1mL
者，用双料
胆盐发酵管
及1mL以下
用单料乳糖
发酵管。每
释度接种3
置36±1℃
内，培养24±2h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有
者，则按下列程序进行。
73分离培养
将产气的发酵管分别转种在伊红美r